化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100T | 1～3天 |
商品介紹：
工作原理： 在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活 ，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標(biāo)記的 dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點(diǎn)部位，可以通過生物標(biāo)記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC)，然后加入顯色底物 DAB 予以顯示。凋亡的細(xì)包核呈黃色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。 |
保存條件：-20℃冰凍保存一年。
試劑盒內(nèi)容：
1.標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)5ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)100μl
3.DIG-dUTP(×20)100μl
4.封閉液(Blocking Reagent)20ml
5.生物素化抗抗體(×100)100μl
6.SABC(×100)100μl
7.Proteinase K(×200)250μl
8．抗體稀釋液 20ml
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
酚磺基轉(zhuǎn)移(PST)elisa試劑盒英文名稱：PST ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框9抗體包裝1g
胞外超氧化物歧化(SOD3)elisa試劑盒英文名稱：SOD3 ELISA Kit腫瘤高表達(dá)周期相關(guān)蛋白抗體包裝25g
半乳糖凝集9(GAL9)elisa試劑盒英文名稱：GAL9 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框117抗體包裝5g
半乳糖凝集7(GAL7)elisa試劑盒英文名稱：GAL7 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框120抗體包裝1g
半乳糖苷β(GLβ)elisa試劑盒英文名稱：GLβ ELISA Kit補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體包裝25g
半乳糖苷α(GLα)elisa試劑盒英文名稱：GLα ELISA Kit補(bǔ)體C1qγ鏈多肽抗體包裝5g
半乳凝8(GAL8)elisa試劑盒英文名稱：GAL8 ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性絲蛋白激抗體包裝1g
半乳凝6(GAL6)elisa試劑盒英文名稱：GAL6 ELISA Kit老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體包裝5g
半乳凝4(GAL4)elisa試劑盒英文名稱：GAL4 ELISA Kit質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白3抗體包裝1g
半乳凝2(GAL2)elisa試劑盒英文名稱：GAL2 ELISA KitComplexin I/復(fù)合1抗體包裝5g
半乳凝12(GAL12)elisa試劑盒英文名稱：GAL12 ELISA KitComplexin II/復(fù)合2抗體包裝1g
半胱豐富血管生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)elisa試劑盒英文名稱：CYR61 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPγ抗體包裝25g
半胱蛋白抑制劑3(CST3)elisa試劑盒英文名稱：CST3 ELISA Kit質(zhì)連接蛋白2抗體包裝5g
白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)elisa試劑盒英文名稱：LECT2 ELISA KitCD20抗體包裝100g
白細(xì)胞衍生趨化因子1(LECT1)elisa試劑盒英文名稱：LECT1 ELISA Kit12號(hào)染色體開放閱讀框40抗體包裝500g
: AS3.800資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品印度猬因子試劑盒蕓苔內(nèi)酯;Brassinolide
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,一合物,BR,可用于培養(yǎng)隱熱蛋白試劑盒原薯蕷皂苷;Protodioscin
長棒孢Camposporium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品吲哚2,3-雙加氧試劑盒乙酰黃芪皂苷I;Acetytastrag
細(xì)胞凋亡檢測試劑盒V(POD)乙脫氫
其他去氫
英文名稱：ADH
其他英文名稱：Alcohol Dehydrogenase from yeast； Alcohol：NAD+ oxidoreductase
產(chǎn)品規(guī)格：BR，300u/mg，液體
包裝：15KU/75KU
產(chǎn)品規(guī)格：BR，300u/mg，粉末
包裝：15KU/7.5KU
CAS號(hào)：9031-72-5
級(jí)別：BR
活力：≥300units/mg protein
活力定義：One unit will reduces one micromole of NAD per minute at pH 8.8，25℃
活力定義：One unit will liberate 1.0 mg reducing sugar (as glucose) from Xylan per minute at pH 4.5 at 37℃
性狀：粉末
用途：生化研究
保存：-20℃
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
化工儀器網(wǎng)