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小鼠血管外膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 12:39:29瀏覽次數(shù):326

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 血管組織
小鼠血管外膜成纖維細胞的相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 IG-24中國倉鼠卵巢細胞倉鼠細胞系1×106LEC-1倉鼠卵巢細胞倉鼠細胞系1×106V79倉鼠肺細胞倉鼠細胞系1×1063D4/21豬肺泡巨噬細胞豬細胞系1×106PK-13豬腎細胞系豬細胞系1×106

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠血管外膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

血管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主,當血管受損傷時,成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一,其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

英文名稱: IDO1 原癌基因ROS1封閉多肽 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子ONECUT2抗體 醛縮C封閉多肽 小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒ELISA

6號染色體開放閱讀框64抗體 乳腺癌細胞分化因子P45封閉多肽 小鼠己糖激(HK)ELISA檢測試劑盒

胞漿磷蛋白PACSIN2抗體 黑色瘤相關(guān)抗原5封閉多肽 小鼠脫氫E1(PDHE1)elisa試劑盒

磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激抗體 程序性死亡配體1(CD274)封閉多肽 小鼠糖原合成激(GSK)試劑盒elisa

淋巴限制膜蛋白Jaw1抗體 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運家族蛋白13封閉多肽 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)檢測試劑盒elisa

磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激抗體 磷化微管相關(guān)蛋白4封閉多肽 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨(u-T3)ELISA試劑盒

細胞角蛋白80抗體 碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4封閉多肽 小鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒ELISA

核苷結(jié)合蛋白2抗體 EPG5蛋白封閉多肽 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA檢測試劑盒

NXN蛋白抗體 氧固醇結(jié)合蛋白樣2封閉多肽 小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)elisa試劑盒

絲氨/蘇氨蛋白激Nek11抗體 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7封閉多肽 小鼠羥脯氨(Hyp)試劑盒elisa

ATP依賴RNA解旋DDX28抗體 磷化斑聯(lián)蛋白封閉多肽 小鼠骨保護配體(OPGL)檢測試劑盒elisa

激肽釋放6抗體 磷化雌激受體β封閉多肽 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

KIAA1370蛋白抗體 分離蛋白SCRN1封閉多肽 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)試劑盒ELISA

單胺氧化B抗體 鋅指蛋白652封閉多肽 小鼠鐵蛋白(FE)ELISA檢測試劑盒

染色盒同源物4抗體 轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK2封閉多肽 小鼠碳酐2(CA-2)elisa試劑盒

微管蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體52封閉多肽 小鼠色上皮衍生因子(PEDF)試劑盒elisa

CD34抗體 8號染色體開放閱讀框58封閉多肽 小鼠解整合樣金屬8(ADAM8)檢測試劑盒elisa
小鼠血管外膜成纖維細胞CCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCD841 CON細胞專用培養(yǎng)基125ML

CCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCD841 CON細胞專用培養(yǎng)基500ML

CCRF-CEM人急性淋巴白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCRF-CEM細胞專用培養(yǎng)基125ML

CCRF-CEM人急性淋巴白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CCRF-CEM細胞專用培養(yǎng)基500ML

CEM/C1人急性淋巴白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CEM/C1細胞專用培養(yǎng)基125ML

CEM/C1人急性淋巴白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CEM/C1細胞專用培養(yǎng)基500ML

CFPAC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CFPAC-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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