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小鼠精原干細胞

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更新時間:2023-04-21 13:22:31瀏覽次數(shù):250

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 睪丸組織
小鼠精原干細胞的相關產品:HSF(SV40)人真皮成纖維(原代永生化)細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLHT-1080人纖維肉瘤細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLHT-1080人纖維肉瘤細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLHT-1376人膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLHT-1376人膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠精原干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

睪丸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內的一群生精干細胞,是成體內的定向干細胞。精原干細胞的一些優(yōu)勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節(jié)機制的深入研究,精子發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染,異體、異種移植技術的實際應用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內,精子發(fā)生時一個受高度調控和持續(xù)的過程,精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至后生成精子。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物精子發(fā)生的原始細胞,也是動物體內一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學、醫(yī)學、畜牧業(yè)生產及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先機械吹打、后胰dan白消化,結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經c-kit免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、圓形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化活化復制因子2抗體 1號染色體開放閱讀框96封閉多肽 人乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒

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交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian SKAP55蛋白封閉多肽 人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)試劑盒ELISA

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波形蛋白抗體 酪氨蛋白激A5受體封閉多肽 人胰島樣生長因子結合蛋白5(IGFBP-5)試劑盒ELISA

過氧化物-2抗體 ATPIF1蛋白封閉多肽 人胰島樣生長因子2受體(IGF-2R)檢測試劑盒elisa
小鼠精原干細胞SK-N-BE(2)人神經母瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-BE(2)細胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-N-MC人神經上皮瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-MC細胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-N-MC人神經上皮瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-MC細胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-NEP-1人腎母瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NEP-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-NEP-1人腎母瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NEP-1細胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-NO-1人急性髓系白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NO-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-NO-1人急性髓系白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NO-1細胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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