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大鼠支氣管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 12:36:41瀏覽次數:232

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 支氣管組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠支氣管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

支氣管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經支氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能:①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);②支氣管平滑肌特異的超微結構特點和調節(jié)機制是支氣管正常生理功能的基礎;③支氣管平滑肌通過分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質,發(fā)揮免疫調節(jié)功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

葡萄糖調節(jié)蛋白94抗體 DEPTOR蛋白封閉多肽 小鼠嗜粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

緊密連接蛋白1抗體 碳水化合物磺基轉移12封閉多肽 小鼠嗜粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)試劑盒ELISA

5-羥色胺受體2B抗體 TOMM22蛋白封閉多肽 小鼠紅細胞生成(EPO)ELISA檢測試劑盒

乙酰化組蛋白H1b抗體 鈉碘轉運體蛋白8封閉多肽 小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)elisa試劑盒

人前列腺特異性抗原單克隆抗體 泌乳封閉多肽 小鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒elisa

英文名稱: STAT6 異戊酰脫氫封閉多肽 小鼠Slit2檢測試劑盒elisa

磷化轉錄調節(jié)因子CEBP α 抗體 聚磷肌醇磷4B封閉多肽 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒

磷化雌激受體α抗體 G蛋白信號轉導調節(jié)因子18封閉多肽 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒ELISA

英文名稱: NQO1 微絲相關蛋白1封閉多肽 小鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測試劑盒

脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 原鈣粘蛋白γA2封閉多肽 小鼠降鈣原(PCT)elisa試劑盒

鋅指蛋白ZBTB5抗體 核因子NFκB激活蛋白1封閉多肽 小鼠胰島自身抗體(IAA)試劑盒elisa

PSMα5單克隆抗體 磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白封閉多肽 小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測試劑盒elisa

凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 叉頭蛋白H1封閉多肽 小鼠白介7(IL-7)ELISA試劑盒

英文名稱: MEKK3 NDUFB5蛋白封閉多肽 小鼠褪黑(MT)試劑盒ELISA

英文名稱: TNS4 溶質載體家族25成員2封閉多肽 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA檢測試劑盒

色氨羥化抗體 脫氫激1封閉多肽 小鼠熱休克因子1(HSF1)elisa試劑盒

干擾相關發(fā)育調節(jié)因子2抗體 3號染色體開放閱讀框19封閉多肽 小鼠血小板因子3(PF-3)試劑盒elisa

阻抑/腫瘤抑制因子抗體 G蛋白通路抑制蛋白1封閉多肽 小鼠白介2受體(IL-2R)檢測試劑盒elisa
大鼠支氣管平滑肌細胞Bel-7405人肝癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Bel-7405細胞專用培養(yǎng)基125ML

Bel-7405人肝癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Bel-7405細胞專用培養(yǎng)基500ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BEWO細胞專用培養(yǎng)基125ML

BEWO人胎盤絨毛膜癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BEWO細胞專用培養(yǎng)基500ML

BJ人皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BJ細胞專用培養(yǎng)基125ML

BJ人皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BJ細胞專用培養(yǎng)基500ML

BIU-87人膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:BIU-87細胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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