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小鼠胸腺上皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:21:40瀏覽次數(shù):303

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胸腺組織
小鼠胸腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人膀胱癌相關(guān)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人甲狀腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人甲狀腺成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人胰腺星狀細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場所,還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具有內(nèi)分泌技能的器官。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),根據(jù)其在胸腺中位置不同,可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份,其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性,與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體,部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu)。電鏡觀察,可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠胸腺上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胸腺組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

剪切和多聚腺苷化特異性因子73蛋白抗體 鋅指蛋白426封閉多肽 大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA檢測試劑盒

中心體蛋白3抗體 抗菌肽CAMP/LL-37抗菌活性多肽 大鼠β羥丁(βOHB)ELISA Kit

角蛋白相關(guān)蛋白KAP22.1抗體 磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激結(jié)合蛋白1封閉多肽 大鼠細(xì)胞色P450(CYP450)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78封閉多肽 大鼠生長激釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin) 試劑盒 ELISA

英文名稱: Acetyl-Histone H3 (Lys4) 組蛋白去乙酰化3封閉多肽 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨抑制劑(vaspin) ELISA檢測試劑盒

DNAJB14蛋白抗體 細(xì)胞角蛋白74封閉多肽 大鼠溴脫氧核苷(BrdU) ELISA Kit

肽基脯氨酰順反異構(gòu)FKBP11抗體 親和 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1重組兔單克隆抗體 磷化核因子κB抑制蛋白α封閉多肽體 大鼠細(xì)胞色P4502E1(CYP2E1) 試劑盒 ELISA

垂體瘤細(xì)胞凋亡抗體 神經(jīng)前體細(xì)胞發(fā)育下調(diào)蛋白4封閉多肽 大鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測試劑盒

溶質(zhì)載體家族蛋白19成員A1抗體 增食欲A/欲激A封閉多肽 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) ELISA Kit

甲基肽受體1抗體 GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白封閉多肽 大鼠過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷1抗體 磷化淋巴細(xì)胞特異性蛋白酪氨激封閉多肽 大鼠鈣調(diào)(CAM) 試劑盒 ELISA

谷氨半胱氨γ合成抗體 FAM200A蛋白封閉多肽 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測試劑盒

磷化半胱胺蛋白6抗體 半乳糖凝集14封閉多肽 大鼠網(wǎng)膜(omentin)ELISA Kit

組氨三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 線粒體琥珀脫氫D封閉多肽 大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒

液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體 白細(xì)胞介29封閉多肽 大鼠蛋白磷(PP) 試劑盒 ELISA

γ氨基丁運(yùn)載蛋白1抗體 谷氨受體NMDAζ2封閉多肽 大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)ELISA檢測試劑盒

松弛3抗體 磷化Rho相關(guān)蛋白激2封閉多肽 大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA Kit
小鼠胸腺上皮細(xì)胞兔乳腺上皮細(xì)胞英文名稱:兔乳腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔乳腺成纖維細(xì)胞英文名稱:兔乳腺成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔卵巢內(nèi)膜細(xì)胞英文名稱:兔卵巢內(nèi)膜細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔子宮成纖維細(xì)胞英文名稱:兔子宮成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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