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人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:14:08瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SW620+GFP人結(jié)直腸腺癌+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSW620/5FU人結(jié)直腸癌氟耐藥株細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSW620/5FU人結(jié)直腸癌氟耐藥株細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSW780人膀胱移行癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSW780人膀胱移行癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對(duì)機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見到透明層。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化、后胰dan白 - 膠原混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

SDR42E1蛋白抗體 磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白p130封閉多肽 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒

富含絲氨/精氨重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體 含SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D5封閉多肽 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12) ELISA Kit

原鈣粘蛋白β4抗體 8號(hào)染色體開放閱讀框45封閉多肽 人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒

F-box蛋白21抗體 Ki67蛋白封閉多肽 人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體102抗體 干擾α2封閉多肽 人可溶性CD40配體(sCD40L) ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化鳥苷調(diào)節(jié)蛋白12抗體 磷化周期依賴激2封閉多肽 人可溶性CD30配體(sCD30L) ELISA Kit

緊密連接蛋白17抗體 軸蛋白1封閉多肽 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5) ELISA試劑盒

英文名稱: TCF3 鉀離子通道蛋白6封閉多肽 人P選擇(P-Selectin/CD62P/GMP140)試劑盒 ELISA

鈣敏感受體1抗體 分泌型白細(xì)胞抑制因子封閉多肽 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)ELISA檢測(cè)試劑盒

RNA結(jié)合蛋白15B抗體 DNAJB8蛋白封閉多肽 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA Kit

丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗體 氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成A1封閉多肽 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA試劑盒

生殖細(xì)胞相關(guān)1樣蛋白抗體 晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEs蛋白 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)試劑盒 ELISA

腺苷單磷活化蛋白激α2單克隆抗體 酪蛋白激1γ1封閉多肽 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF) ELISA檢測(cè)試劑盒

PerCP標(biāo)記人CD5單克隆抗體 GTP結(jié)合蛋白R(shí)AC1+RAC2封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA Kit

磷化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 周期依賴性激2封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒

染色體濃縮調(diào)節(jié)蛋白2抗體 衣殼蛋白-ζ2封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4) 試劑盒 ELISA

RASAL2蛋白抗體 磺基轉(zhuǎn)移CSPS封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: delta 1 Catenin 尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子1封閉多肽 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA Kit
人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞人氣管上皮細(xì)胞英文名稱:人氣管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人氣管平滑肌細(xì)胞英文名稱:人氣管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人支氣管上皮細(xì)胞英文名稱:人支氣管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人支氣管平滑肌細(xì)胞英文名稱:人支氣管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肺成纖維細(xì)胞英文名稱:人肺成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:人肺動(dòng)脈高壓血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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