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人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:05:19瀏覽次數(shù):247

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 羊膜組織
人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:DU145人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLEA.hy926人臍靜脈融合細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLEA.hy926人臍靜脈融合細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLEca-109人食管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLEca-109人食管癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胎盤羊膜組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

羊膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化白介-1受體相關(guān)激4抗體 鋅指蛋白257封閉多肽 大鼠大內(nèi)皮(BigET)ELISA試劑盒

英文名稱: His tag 磷化孤兒核受體蛋白Nur77封閉多肽 大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)試劑盒ELISA

磷化c-fos抗體 鈣調(diào)蛋白激激α封閉多肽 大鼠降鈣(CT)ELISA檢測(cè)試劑盒

核受體相關(guān)因子-1抗體 SDOS蛋白封閉多肽 大鼠骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)elisa試劑盒

英文名稱: Beta tubulin (Loading Control) N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1封閉多肽 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒elisa

磷脂酰肌醇激抗體 EAP30蛋白封閉多肽 大鼠促甲狀腺(TSH)檢測(cè)試劑盒elisa

小鼠抗人CD71單克隆抗體 增殖細(xì)胞核抗原封閉多肽 大鼠(Cortisol)ELISA試劑盒

CD23/FcεRII抗體 核孔蛋白NUP160封閉多肽 大鼠雌二醇(E2)試劑盒ELISA

磷化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體 蛋白酪氨磷非受體型4封閉多肽 大鼠脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: Tubulin-alpha (Loading Control) 短鏈脫氫/還原家族4樣2蛋白封閉多肽 大鼠睪酮(T)elisa試劑盒

前列腺F2a受體抗體PGF2αR 鈣粘蛋白相關(guān)蛋白受體BTR1封閉多肽 大鼠游離睪酮(F-TESTO)試劑盒elisa

類腫瘤性抗原MA3抗體 磷化樁蛋白Paxillin封閉多肽 大鼠雄烯二酮(ASD)檢測(cè)試劑盒elisa

內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 細(xì)胞角蛋白5封閉多肽 大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒

糖皮質(zhì)激受體抗體 5-羥色胺受體4封閉多肽 大鼠17羥孕酮(17-OHP)試劑盒ELISA

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體 GATA結(jié)合蛋白4封閉多肽 大鼠三碘甲狀腺原氨(T3)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: GFAP 糖蛋白33封閉多肽 大鼠甲狀腺(T4)elisa試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 重組人促卵泡刺激蛋白 大鼠游離甲狀腺(FT4)試劑盒elisa

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(CD71)抗體 G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB相互作用蛋白4封閉多肽 大鼠游離三碘甲狀腺原氨(Free-T3)檢測(cè)試劑盒elisa
人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞MV-4-11人髓性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MV-4-11細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NALM-6人前B急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NALM-6細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NALM-6人前B急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NALM-6細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NB 4急性早幼粒株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NB 4細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NB 4急性早幼粒株細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NB 4細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCCIT人畸胎癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCCIT細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCCIT人畸胎癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCCIT細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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