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小鼠腸平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:58:31瀏覽次數(shù):308

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 小腸組織
小鼠腸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:H1細(xì)胞培養(yǎng)添加劑(配套)細(xì)胞培養(yǎng)基20mLMatrigel基質(zhì)膠(相關(guān)2)細(xì)胞培養(yǎng)基5mLH1細(xì)胞專(zhuān)用因子Y27632(相關(guān)3)細(xì)胞培養(yǎng)基1mgH1細(xì)胞鋪底工作液(可替代CA004)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒(培養(yǎng)體系)細(xì)胞培養(yǎng)基200mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠腸平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門(mén),下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過(guò)小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運(yùn)動(dòng)。小腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結(jié)締組織惡性腫瘤中常見(jiàn)的一種。因此,體外小腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)對(duì)研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前提。此外,體外培養(yǎng)細(xì)胞,由于影響因素較為單一,是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的基礎(chǔ)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化胞吞再循環(huán)相關(guān)銜接蛋白CENTB1抗體 原肌球蛋白調(diào)節(jié)蛋白4封閉多肽 

肌球蛋白19/Myosin XIX抗體 磷化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白封閉多肽 

CD8抗體 周期A2封閉多肽 

英文名稱(chēng): ACE2 嗅覺(jué)受體5H6封閉多肽 

磷鞘氨醇裂解1抗體 鉬輔因子合成蛋白2封閉多肽 

肌微管相關(guān)蛋白9抗體 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2封閉多肽 

磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體 G蛋白偶聯(lián)受體10封閉多肽 

磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體 小細(xì)胞跨膜糖化蛋白封閉多肽 

腺苷環(huán)化9抗體 核仁蛋白C23封閉多肽 

乙醇脫氫1抗體 蛋白質(zhì)酪氨激JAK2封閉多肽 

嗜性粒細(xì)胞顆粒關(guān)鍵堿性蛋白抗體 PALM3封閉多肽 

快速蛋白A抗體 絲氨/蘇氨蛋白激SRPK2封閉多肽 

E3泛蛋白連接CHIP蛋白抗體 HOMER2封閉多肽 

硫軟骨N-乙酰氨半乳糖胺基轉(zhuǎn)移2抗體 豬瘟病毒包膜糖蛋白E2封閉多肽 

10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體 核糖體結(jié)合蛋白1封閉多肽 

視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48抗體 神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1封閉多肽 

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體 宮頸癌癌基因4封閉多肽 

免疫球蛋白超家族成員3抗體 髓過(guò)氧化物封閉多肽 
小鼠腸平滑肌細(xì)胞大鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠支氣管成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠支氣管成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠支氣管成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

AE-2細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4AE-2細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持AE-2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含AE-2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于AE-2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MS1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4MS1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MS1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MS1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于MS1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人真皮淋巴上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人真皮淋巴上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人真皮淋巴上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人真皮淋巴上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

PATU8988細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4PATU8988細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持PATU8988細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PATU8988細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于PATU8988細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠晶狀體上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠晶狀體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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