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大鼠心臟微血管周細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:19:50瀏覽次數(shù):237

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 心臟組織
大鼠心臟微血管周細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人gang門上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腸系膜動脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人結(jié)腸癌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腹膜間皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明,心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠心臟微血管周細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

核因子κB抑制蛋白樣蛋白2抗體 FbxL6蛋白封閉多肽 大鼠磷化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒

活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體 Dysfip1蛋白封閉多肽 大鼠核因子κB(NF-κB)試劑盒 ELISA

鋅指蛋白851抗體 線粒體核糖體蛋白S18B封閉多肽 大鼠樹突狀細(xì)胞表面特異性C型凝集-細(xì)胞間黏附分子3結(jié)合非整合分子(DC-SIGN/CD209)ELISA檢測試劑盒

EVI5L蛋白抗體 9號染色體開放閱讀框62封閉多肽 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA Kit

NPHP3蛋白抗體 脫氫激4封閉多肽 大鼠解整合樣金屬9(ADAM9) ELISA試劑盒

β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體 微絲相關(guān)蛋白3樣封閉多肽 大鼠c-fos 試劑盒 ELISA

細(xì)胞凋亡抑制因子3α抗體 環(huán)指蛋白148封閉多肽 大鼠c-jun  ELISA檢測試劑盒

三磷腺苷家族蛋白3A抗體 神經(jīng)元電壓門控鈉通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ封閉多肽 大鼠可溶性白介6受體(sIL-6R)ELISA Kit

分支GBE1抗體 FIGNL1蛋白封閉多肽 大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 促甲狀腺釋放激封閉多肽 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)試劑盒 ELISA

巖藻糖轉(zhuǎn)移8抗體 ADP核糖基化因子樣蛋白13b封閉多肽 大鼠骨堿性磷(BALP)ELISA檢測試劑盒

鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白8抗體 PRDM鋅指轉(zhuǎn)錄因子PRDM16封閉多肽 大鼠凝聚(CLU)ELISA Kit

19號染色體開放閱讀框45抗體 卵巢癌相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒

羥酰水解蛋白抗體 磷化p21激活激1封閉多肽 大鼠白介32(IL-32)試劑盒 ELISA

Nibp蛋白抗體 對接蛋白EFS封閉多肽 大鼠孕酮受體(PROGR) ELISA檢測試劑盒

載脂蛋白L3抗體 GBT1蛋白封閉多肽 大鼠白介21(IL-21) ELISA Kit

RNA結(jié)合蛋白6單克隆抗體 單純皰疹病毒1型DNA聚合催化亞單位封閉多肽 大鼠D-乳脫氫(D-LDH) ELISA試劑盒

賴氨酰氧化相關(guān)蛋白2抗體 水通道蛋白0封閉多肽 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)試劑盒 ELISA
大鼠心臟微血管周細(xì)胞兔前列腺上皮細(xì)胞英文名稱:兔前列腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔前列腺成纖維細(xì)胞英文名稱:兔前列腺成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎周細(xì)胞英文名稱:兔腎周細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔前列腺基底細(xì)胞英文名稱:兔前列腺基底細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞英文名稱:兔腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎集合管上皮細(xì)胞英文名稱:兔腎集合管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔輸尿管成纖維細(xì)胞英文名稱:兔輸尿管成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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