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小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:54:30瀏覽次數(shù):279

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腎組織
小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:neuro-2a小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106neuro-2a+luc小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光標(biāo)記小鼠細(xì)胞系1×106NG108-15小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細(xì)胞移植可部分解決供體腎短缺的問(wèn)題,是未來(lái)可以替代腎臟移植的有效方法。因此,體外腎細(xì)胞的培養(yǎng)受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)專(zhuān)家的密切關(guān)注。原代腎細(xì)胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對(duì)象,其分離方法主要有機(jī)械研磨分離法和消化法,消化法因?qū)?xì)胞損傷小、分離效果好而優(yōu)于機(jī)械研磨分離法;目前常用的消化法主要是胰dan白消化法和膠原消化法。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 胰dan白混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

線(xiàn)粒體絲氨抗體 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4封閉多肽 人著絲粒蛋白B(CENP-B)ELISA試劑盒

富馬水合單克隆抗體 FBG4蛋白封閉多肽 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)試劑盒ELISA

半胱胺-7抗體 腺苷受體蛋白封閉多肽 人雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA檢測(cè)試劑盒

EGF毒受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 腎細(xì)胞癌抗原nyren39封閉多肽 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)elisa試劑盒

英文名稱(chēng): Histone H3 (Nuclear Loading Control) 嗅覺(jué)受體51B2封閉多肽 人軟骨寡聚蛋白(COMP)試劑盒elisa

環(huán)指蛋白193抗體 鋅指蛋白ZBTB6封閉多肽 人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)檢測(cè)試劑盒elisa

SMAD家族9抗體 萊克多巴胺牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人高速泳動(dòng)蛋白17(HMG-17)ELISA試劑盒

B細(xì)胞遷移基因2抗體 SLFN13蛋白封閉多肽 人空泡毒相關(guān)蛋白A(VacA)試劑盒ELISA

A-Raf抗體 磷化波形蛋白封閉多肽 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 220kDa蛋白激D相互作用蛋白封閉多肽 人波形蛋白(VIM)elisa試劑盒

甲胎蛋白AFP抗體 NDUFB8蛋白封閉多肽 人表面活性蛋白D(SP-D)試劑盒elisa

聚磷肌醇磷5A抗體 電壓依賴(lài)性鈣通道Cav1.1封閉多肽 人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化原癌基因c-Jun抗體 粘著斑蛋白封閉多肽 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體 磷化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin封閉多肽 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)試劑盒ELISA

泛連接抗體 維甲誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白1封閉多肽 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA檢測(cè)試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 葡萄糖氧化封閉多肽 人β2糖蛋白(β2-GP)elisa試劑盒

維甲相關(guān)孤兒受體β抗體 緊密連接蛋白3封閉多肽 人α乳清蛋白(α-La)試劑盒elisa

細(xì)胞角蛋白18抗體 蛋白激C亞性D型封閉多肽 人N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴(lài)氨酰-脯氨(AcSDKP)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):95-D細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125ML

95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):95-D細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基500ML

A172人膠質(zhì)母瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):A172細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125ML

A172人膠質(zhì)母瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):A172細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基500ML

A-204人橫紋肌肉瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):A-204細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125ML

A-204人橫紋肌肉瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):A-204細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基500ML

A2058人黑色瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基英文名稱(chēng):A2058細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125ML


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