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大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:53:12瀏覽次數(shù):277

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 膽管組織
大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14小鼠細(xì)胞系1×106MEF小鼠胚胎成纖維細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106MEF(絲裂霉C處理)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106MFC小鼠前胃癌細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106MH-S小鼠肺泡巨噬細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

膽管組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝外膽管組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見(jiàn)的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等,都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位,引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對(duì)研究膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原灌注消化法后,再用膠原-DNA聯(lián)合消化,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

整合αVβ5抗體 酪氨蛋白激細(xì)胞分裂封閉多肽 人肌養(yǎng)蛋白(dystrophin)ELISA試劑盒

腫瘤蛋白P73抗體 LINS蛋白封閉多肽 人膠原凝集(Collectin)試劑盒ELISA

EMID2蛋白抗體 磷化白細(xì)胞介13受體α1封閉多肽 人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA檢測(cè)試劑盒

甲狀腺激受體相關(guān)蛋白復(fù)合物230抗體 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框156封閉多肽 人纖調(diào)蛋白(FMOD)elisa試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體49抗體 EFCAB6蛋白封閉多肽 人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)試劑盒elisa

同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體 氧固醇結(jié)合蛋白1封閉多肽 人網(wǎng)膜(omentin)檢測(cè)試劑盒elisa

孤兒核受體PAR1抗體 FLAG Tag多肽 人基質(zhì)γ羧基谷氨蛋白(MGP)ELISA試劑盒

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike S1 G氨基丁A型受體rho3 /GABAA Rρ2/GABAc Rρ3封閉多肽 人基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶(MAT)試劑盒ELISA

泛結(jié)合蛋白P62抗體 去泛16封閉多肽 人螺旋肽(THP)ELISA檢測(cè)試劑盒

載脂蛋白A4抗體 組蛋白H2B封閉多肽 人溶體相關(guān)膜蛋白2(HLAMP-2)elisa試劑盒

金屬組織抑制因子-1單克隆抗體 G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1封閉多肽 人軟骨糖蛋白39(HCgp-39)試劑盒elisa

蛋白酪氨磷D1抗體 FAM55D蛋白封閉多肽 人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)檢測(cè)試劑盒elisa

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike Neutralizing 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48封閉多肽 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA試劑盒

英文名稱: Aurora B 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子封閉多肽 人多聚血清蛋白(PHSA)試劑盒ELISA

周期依賴性激4抗體 磷化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1封閉多肽 人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA檢測(cè)試劑盒

微管相關(guān)腫瘤抑制因子1 抗體 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20封閉多肽 人纖維介蛋白(fgl2)elisa試劑盒

磷化干擾α/β受體1抗體 核突觸蛋白-β封閉多肽 人泛蛋白(Ub)試劑盒elisa

谷氨受體2C抗體 24α7羥化封閉多肽 人類粘蛋白(ORM)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞143B人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:143B細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

143B人骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:143B細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

22RV1人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:22RV1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

22RV1人前列腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:22RV1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

293FT人胚腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:293FT細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

293FT人胚腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:293FT細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

293T人胚腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:293T細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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