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大鼠破骨細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:33:28瀏覽次數(shù):298

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
大鼠破骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:產(chǎn)品名稱:過氧化mei2(GPX2)重組蛋白英文名稱:Recombina Glutathione Peroxidase 2, Gastroiestinal (GPX2)產(chǎn)品名稱:賴氨suaRNA合成mei(KARS)重組蛋白英文名稱:Recombina Lysyl tRNA Syhetase (KARS)產(chǎn)品名稱:異亮氨酰tRNA合成mei(IARS)重組蛋白英文名

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠破骨細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自分離自骨骼外的造血系統(tǒng),其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時(shí)間較短。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)TRAP染色檢測,純度可達(dá)30%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  多核、巨細(xì)胞

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

破骨細(xì)胞刺激因子1抗體 鋅指蛋白572封閉多肽 

磷化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 RGAG1蛋白封閉多肽 

磷化原癌基因RAF1抗體 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白封閉多肽 

吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白1抗體 雙特異性磷封閉多肽12封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體7抗體 鋅指蛋白697封閉多肽 

脫磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 白介2封閉多肽 

GRXCR1蛋白抗體 甲狀腺激反應(yīng)蛋白封閉多肽 

SPRED1蛋白抗體 p180 CAF1蛋白封閉多肽 

山羊抗人乙肝表面抗原抗體(包被) 環(huán)指蛋白14封閉多肽 

液泡蛋白分選蛋白25抗體 蛋白激Aγ封閉多肽 

胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈2抗體 絲氨/蘇氨蛋白激H2封閉多肽 

跨膜蛋白2樣蛋白抗體 尤文氏肉瘤相關(guān)EWS蛋白封閉多肽 

p53和DNA損傷調(diào)節(jié)蛋白1抗體 紡錘體檢查點(diǎn)蛋白封閉多肽 

磷化神經(jīng)細(xì)胞鳥苷置換因子Ephexin1抗體 磷化雄激受體封閉多肽 

磷化原癌基因RAF1抗體 鋅指蛋白544封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 隱花色蛋白1封閉多肽 

巰基氧化1抗體 蓬亂蛋白2封閉多肽 

干擾α11抗體 重組人轉(zhuǎn)錄因子SOX10蛋白 
大鼠破骨細(xì)胞3T3-L1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×43T3-L1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持3T3-L1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含3T3-L1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于3T3-L1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

A875 [A-875]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4A875 [A-875]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持A875 [A-875]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含A875 [A-875]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于A875 [A-875]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SV40 MES 13細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SV40 MES 13細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SV40 MES 13細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SV40 MES 13細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SV40 MES 13細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人大隱靜脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RSC96細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4RSC96細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RSC96細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RSC96細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RSC96細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人小腦顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人小腦顆粒細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人小腦顆粒細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人小腦顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM/F12 (不含酚紅,含L-丙氨酰-L-、HEPES)500mL-


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