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大鼠胰腺上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:52:37瀏覽次數(shù):301

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胰腺組織
大鼠胰腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:LLC+LUC小鼠肺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記小鼠細(xì)胞系1×106L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106L929小鼠成纖維細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106MA-891小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠胰腺上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自分離自內(nèi)胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發(fā)育過程中,胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞(α、β、δ、PP細(xì)胞)、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細(xì)胞,包括成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,其中以成纖維細(xì)胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來源的細(xì)胞,尤其是成纖維細(xì)胞。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機(jī)械刮除法、胰dan白消化以及膠原消化法等,胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原分次消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

色上皮源性因子抗體 乳脫氫A樣蛋白6B封閉多肽 人類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒

甲狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體 磷化B-Raf封閉多肽 人MAX二聚化蛋白1(mxd1)試劑盒ELISA

組蛋白H3 K79甲基轉(zhuǎn)移抗體 肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A封閉多肽 人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA檢測試劑盒

磷化周期依賴性激9抗體 RRP1B蛋白封閉多肽 人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)elisa試劑盒

ATP5A抗體 核受體RXRα封閉多肽 人主要穹窿蛋白(MVP)試劑盒elisa

維甲相關(guān)孤兒受體γt抗體 結(jié)腸癌抗原10封閉多肽 人泛蛋白D(UBD)檢測試劑盒elisa

環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 致死因子惡性腦瘤樣蛋白4封閉多肽  人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒

蛋白激A抗體 磷激1封閉多肽 人青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)試劑盒ELISA

水通道蛋白-2抗體 Rho GTP激活蛋白20封閉多肽 人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA檢測試劑盒

糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體 呼吸道合胞病毒封閉多肽 人蝸牛同源物2(SNAI2)elisa試劑盒

淋巴細(xì)胞活化基因-3(CD223)抗體 氧固醇結(jié)合蛋白樣11封閉多肽 人高爾基蛋白73(GP-73)試劑盒elisa

磷化蛋白酪氨磷1C抗體 6號(hào)染色體開放閱讀框62封閉多肽 人TU3A蛋白(TU3A)檢測試劑盒elisa

有脊椎動(dòng)物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體 鋅指蛋白79封閉多肽 人電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒

EXD2蛋白抗體 細(xì)胞色P450 F3封閉多肽 人皮膚蛋白(DPT)試劑盒ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體103抗體 磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1封閉多肽 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA檢測試劑盒

ChAT乙酰轉(zhuǎn)移抗體 重組人白細(xì)胞介-17 (活性的) 人降解加速因子(DAF)elisa試劑盒

磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 血管內(nèi)皮生長因子C型封閉多肽 人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)試劑盒elisa

原鈣粘蛋白7抗體 磷化MAP激相互作用絲氨/蘇氨激1封閉多肽 人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)檢測試劑盒elisa
大鼠胰腺上皮細(xì)胞小鼠卵巢顆粒細(xì)胞永生化英文名稱:小鼠卵巢顆粒細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化英文名稱:小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

GFP小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化+GFP英文名稱:GFP1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化英文名稱:小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化英文名稱:小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化英文名稱:小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化英文名稱:人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化1×106提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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