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大鼠陰莖白膜成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 13:40:58瀏覽次數(shù):310

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 陰莖組織
大鼠陰莖白膜成纖維細胞的相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97L人高轉(zhuǎn)移性肝癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLMIA-PACA-2人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLMIA-PACA-2人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLMKN-45人胃癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLMKN-45人胃癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠陰莖白膜成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

陰莖組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自陰莖白膜組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的陰莖白膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。陰莖白膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質(zhì)細胞,它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原 - 胰dan白聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體 多囊腎蛋白1樣蛋白2封閉多肽 人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA試劑盒

補體C6抗體 磷脂轉(zhuǎn)移蛋白封閉多肽 人抗醛縮(ALD)自身抗體試劑盒ELISA

細胞表面趨化因子受體4抗體 腺苷單磷活化蛋白激α2封閉多肽 人抗鞘磷脂抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒

馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 FAM5C蛋白封閉多肽 人抗鞘磷脂抗體(IgG) ELISA試劑盒

有絲分裂激A抗體 補體組分1q子成分樣蛋白1封閉多肽 人抗鞘磷脂抗體(IgA)試劑盒ELISA

一種腫瘤抑制基因抗體 整合β3/CD61封閉多肽 人抗皮膚抗體(ASA)檢測試劑盒elisa

17號染色體開放閱讀框78抗體 周期依賴性激6封閉多肽 人抗旁瘤抗原Ma2(PNMA2)抗體ELISA試劑盒

血管緊張III抗體 核糖核3/Drosha封閉多肽 人抗凝脂(PL)抗體(IgM)試劑盒ELISA

英文名稱: GAPDH (Loading Control) RALGPS2蛋白封閉多肽 人抗凝脂(PL)抗體(IgG)ELISA檢測試劑盒

巢蛋白1抗體 環(huán)指蛋白7封閉多肽 人抗-磷脂酰絲氨復(fù)合物(RTH-PS)抗體ELISA試劑盒

RNA結(jié)合蛋白11抗體 磷化mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白封閉多肽 人抗III(AT III)試劑盒ELISA

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5抗體 前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2封閉多肽 人抗Ⅲ抗體檢測試劑盒elisa

磷化血管生成受體2抗體 結(jié)合球蛋白β封閉多肽 人抗釀酒酵母抗體(IgG)ELISA試劑盒

早期發(fā)育調(diào)控蛋白1/EDR1抗體 雙氧化1/甲狀腺氧化1封閉多肽 人抗釀酒酵母抗體(IgA)試劑盒ELISA

趨化樣因子超家族成員2亞型1抗體 FLJ46536蛋白封閉多肽 人抗腦皮質(zhì)(CC)自身抗體ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白747抗體 補體因子H相關(guān)蛋白4封閉多肽 人抗內(nèi)因子抗體(IgG)ELISA試劑盒

磷化細胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 鋅指蛋白821封閉多肽 人抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)試劑盒ELISA

6號染色體開放閱讀框25抗體 整合相關(guān)蛋白CD47封閉多肽+O14153 人抗麥角蛋白(Gliadin)抗體(IgA)檢測試劑盒elisa
大鼠陰莖白膜成纖維細胞MB49小鼠膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MB49細胞專用培養(yǎng)基125ML

MB49小鼠膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MB49細胞專用培養(yǎng)基500ML

MB49+LUC小鼠膀胱癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MB49+LUC細胞專用培養(yǎng)基125ML

MB49+LUC小鼠膀胱癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MB49+LUC細胞專用培養(yǎng)基500ML

MC38小鼠結(jié)腸癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MC38細胞專用培養(yǎng)基125ML

MC38小鼠結(jié)腸癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MC38細胞專用培養(yǎng)基500ML

MC38+LUC小鼠結(jié)腸癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MC38+LUC細胞專用培養(yǎng)基125ML


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