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兔氣管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 16:32:49瀏覽次數(shù):293

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 氣管
兔氣管平滑肌細胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠滑膜間充質(zhì)干細胞原代細胞5×105小鼠毛囊干細胞原代細胞5×105小鼠膈肌細胞原代細胞5×105小鼠肌腱成纖維細胞原代細胞5×105小鼠皮下微血管內(nèi)皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔氣管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

氣管

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鋅指蛋白175抗體 胃原C封閉多肽 

載脂蛋白樣蛋白6抗體 重組人白介-1受體拮抗劑蛋白 

干擾β抗體 嗜粒細胞趨化因子/蛋白/Eotaxin封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子CP2抗體 蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移1封閉多肽 

黑色瘤相關(guān)抗原B3抗體 瞬時受體電位通道蛋白4封閉多肽 

KPRP蛋白抗體 CD4封閉多肽 

鋅指蛋白230抗體 胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子PTF1A封閉多肽 

SHISA2蛋白抗體 TIMELESS相互作用蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)蛋白62抗體 鋅指蛋白645封閉多肽 

候選腫瘤抑制基因MARVELD1抗體 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白封閉多肽 

NSMCE1蛋白抗體 去甲基化MBD2封閉多肽 

唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集12抗體 鋅指蛋白683封閉多肽 

A2LD1蛋白抗體 碳氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白5-A10封閉多肽 

Kelch樣蛋白20抗體 磷化β-肌動蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體 細胞角蛋白20封閉多肽 

英文名稱: RuBisCO 染色質(zhì)解旋DNA結(jié)合蛋白3封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF單克隆抗體 蛋白激C delta結(jié)合蛋白封閉多肽 

DNA結(jié)合蛋白C1D抗體 復(fù)制因子A蛋白2封閉多肽+O16484 
兔氣管平滑肌細胞NIH/3T3細胞專用培養(yǎng)基125mL×4NIH/3T3細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持NIH/3T3細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NIH/3T3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NIH/3T3細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基100mL小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠多巴胺神經(jīng)元細胞的體外培養(yǎng)。

P3X63Ag8細胞專用培養(yǎng)基125mL×4P3X63Ag8細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持P3X63Ag8細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含P3X63Ag8細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于P3X63Ag8細胞的體外培養(yǎng)。

Acc-3細胞專用培養(yǎng)基125mL×4Acc-3細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持Acc-3細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Acc-3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Acc-3細胞的體外培養(yǎng)。

KiMA細胞專用培養(yǎng)基125mL×4KiMA細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持KiMA細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含KiMA細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KiMA細胞的體外培養(yǎng)。

人胸腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL人胸腺上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人胸腺上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人胸腺上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胸腺上皮細胞的體外培養(yǎng)。

人間充質(zhì)干細胞清培養(yǎng)基500mL-
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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