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大鼠小腸平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 14:45:22瀏覽次數(shù):263

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 小腸組織
大鼠小腸平滑肌細胞的相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6永生型大鼠肝儲脂細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLHSC-T6永生型大鼠肝儲脂細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLIEC-18大鼠回腸細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLIEC-18大鼠回腸細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLIEC-6大鼠小腸隱窩上皮細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125ML

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。小腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結(jié)締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此,體外小腸平滑肌細胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎(chǔ)和前提。此外,體外培養(yǎng)細胞,由于影響因素較為單一,是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉(zhuǎn)導機制的基礎(chǔ)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠小腸平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 磷化內(nèi)皮細胞受體蛋白酪氨激A2+A3+A4封閉多肽 人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA檢測試劑盒

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 碳酐3封閉多肽 人α肌動蛋白(α Actin)ELISA Kit

英文名稱: Hantaan virus type II MORN1蛋白封閉多肽 人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)ELISA試劑盒

1號染色體開放閱讀框109抗體 腺苷環(huán)化激活肽6-38多肽 人瘦受體(LEPR) 試劑盒 ELISA

SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白5抗體 鋅指蛋白437封閉多肽 人血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)ELISA檢測試劑盒

11號染色體開放閱讀框65抗體 TATA結(jié)合蛋白TBP/TFIID封閉多肽 人血管緊張Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)ELISA Kit

絲氨/蘇氨蛋白激MARK1抗體 瘦封閉多肽 人血管生成4(ANG-4) ELISA試劑盒

促黃體生成單克隆抗體(LH α-亞基) 腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER封閉多肽 人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒 ELISA

蛋白磷3調(diào)節(jié)亞基R2抗體 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)多肽 人熱休克因子1(HSF-1) ELISA檢測試劑盒

核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR抗體 囊泡轉(zhuǎn)運蛋白Use1封閉多肽 人血管活性肽抑制劑(VPI) ELISA Kit

同源盒基因HOXA4蛋白抗體 重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 (活性的, Tag free) 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1) ELISA試劑盒

維生D結(jié)合蛋白抗體 1號染色體開放閱讀框146封閉多肽 人缺血修飾白蛋白(IMA) 試劑盒 ELISA

LIP5抗體 驅(qū)動蛋白家族成員16B封閉多肽 人8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)ELISA檢測試劑盒

磷化鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體 胸腺β10封閉多肽 人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA Kit

HS3ST5蛋白抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α封閉多肽 人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA) ELISA試劑盒

磷化蛋白激AKT底物1抗體 多功能DNA修復封閉多肽 人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)試劑盒 ELISA

α-L-艾杜糖苷抗體 Iroquois同源蛋白4封閉多肽 人平滑肌肌球蛋白(SMM) ELISA檢測試劑盒

血紅蛋白δ抗體 嗅介蛋白樣蛋白2B封閉多肽 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c) ELISA Kit
大鼠小腸平滑肌細胞大鼠外根鞘細胞英文名稱:大鼠外根鞘細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠毛囊角質(zhì)細胞英文名稱:大鼠毛囊角質(zhì)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞英文名稱:大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠脂肪干細胞英文名稱:大鼠脂肪干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠滑膜間充質(zhì)干細胞英文名稱:大鼠滑膜間充質(zhì)干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠毛囊干細胞英文名稱:大鼠毛囊干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠膈肌細胞英文名稱:大鼠膈肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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