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大鼠食管上皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:31:39瀏覽次數(shù):242

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 食管組織
大鼠食管上皮細胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠骨骼肌細胞原代細胞5×105小鼠骨骼肌成纖維細胞原代細胞5×105小鼠纖維環(huán)細胞原代細胞5×105小鼠髓核細胞原代細胞5×105小鼠破骨細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠食管上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

食管組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長和心肺的下降,而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護作用。在食管與胃賁門交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋,其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障,防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是,層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講,食管上皮由兩層組成,基底層和分化層;其中,僅基底層的細胞可以增殖,然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用鏈霉dan白 - 膠原聯(lián)合消化法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人類乳頭狀瘤病毒16單克隆抗體 沉默驅(qū)動蛋白KIF4A封閉多肽 

神經(jīng)細胞分化因子6抗體 前纖維蛋白1封閉多肽 

SMG5蛋白抗體 20號染色體開放閱讀框107封閉多肽 

FLJ21963蛋白抗體 煙堿型乙酰受體AChRα1封閉多肽 

突觸融合蛋白3抗體 細胞周期調(diào)控蛋白D1封閉多肽 

受精卵抑制蛋白1抗體 Wolfram綜合征蛋白1封閉多肽 

角蛋白相關(guān)蛋白KAP27.1抗體 苯丙氨羥化4封閉多肽 

血管生成受體2抗體 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子4封閉多肽 

GalNAc-T4 抗體 21號染色體開放閱讀框24封閉多肽 

內(nèi)皮受體A抗體 SAMD13蛋白封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激PIM3抗體 跨膜蛋白Orai2封閉多肽 

胱抑C單克隆抗體 層粘連相關(guān)多肽蛋白1封閉多肽 

細胞因子誘導(dǎo)蛋白29kDa抗體 NARFL蛋白封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 BAIAP2L2蛋白封閉多肽 

熱休克蛋白70蛋白4抗體 絲裂原活化蛋白激激2封閉多肽 

原癌基因CBL2抗體 腦特異性鈉依賴無機磷轉(zhuǎn)運蛋白封閉多肽 

白介-23抗體 INTS4L1蛋白封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激DCAMKL1單克隆抗體 磷化微管相關(guān)蛋白封閉多肽 
大鼠食管上皮細胞人心臟纖維原細胞培養(yǎng)基100mL人心臟纖維原細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人心臟纖維原細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人心臟纖維原細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人心臟纖維原細胞的體外培養(yǎng)。

293T [HEK-293T]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4293T [HEK-293T]細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持293T [HEK-293T]細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含293T [HEK-293T]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293T [HEK-293T]細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠呼吸道上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠呼吸道上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠呼吸道上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠呼吸道上皮細胞的體外培養(yǎng)。

TTA1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4TTA1細胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持TTA1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含TTA1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于TTA1細胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基100mL兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔骨內(nèi)膜間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)。

M199培養(yǎng)基,干粉5×1L-

人膽管癌組織源細胞培養(yǎng)基100mL人膽管癌組織源細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人膽管癌組織源細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人膽管癌組織源細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人膽管癌組織源細胞的體外培養(yǎng)。

 


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