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小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞

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更新時間:2023-04-23 08:55:09瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 視網(wǎng)膜組織
小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞的相關產(chǎn)品:羊骨骼肌細胞原代細胞5×105羊骨髓間充質干細胞原代細胞5×105牛骨骼肌細胞原代細胞5×105牛脂肪干細胞原代細胞5×105牛骨骼肌微血管內皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

視網(wǎng)膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質細胞,大約占視網(wǎng)膜膠質細胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上,Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發(fā)達的內質網(wǎng),細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態(tài)也會有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的神經(jīng)膠質細胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結構和功能的作用,并調制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動,還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法和胰dan白反復消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化補體成分5受體1抗體 Ras相關蛋白RAB-12封閉多肽 

OTOP3蛋白抗體 高爾基復合體CFR1封閉多肽 

蛋白精氨甲基轉移2抗體 磷化蛋白質酪氨激JAK-1封閉多肽 

肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 γ干擾誘導單核細胞因子封閉多肽 

TMEM157蛋白抗體 細胞凋亡敏感性基因封閉多肽 

早老γ分泌抗體 FAM107B蛋白封閉多肽 

Kelch樣蛋白33抗體 膜相關環(huán)指蛋白11封閉多肽 

英文名稱: Human SAA1 血小板生成受體封閉多肽 

EXOC3L2蛋白/Hepatitis B Virus X antigen抗體 FAM83E蛋白封閉多肽 

英文名稱: EXPB-2 ORC6蛋白封閉多肽 

氨基糖苷類磷結構域蛋白抗體 ESD蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白707抗體 胞吞調控蛋白Eps15封閉多肽 

ATP依賴的解螺旋抗體 8號染色體開放閱讀框86封閉多肽 

跨膜絲氨11D抗體 陽離子轉運調節(jié)樣蛋白2封閉多肽 

纖維束1抗體 干擾調節(jié)因子4結合蛋白封閉多肽 

跨膜蛋白18抗體 甲狀腺相關眼病自身抗原封閉多肽 

醛固酮還原家族1成員C3抗體 γ-谷氨酰轉肽6封閉多肽 

IQCA1蛋白抗體 磷化原癌基因c-Jun封閉多肽 
小鼠視網(wǎng)膜Muller細胞T-47D細胞專用培養(yǎng)基125mL×4T-47D細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持T-47D細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含T-47D細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于T-47D細胞的體外培養(yǎng)。

A-431細胞專用培養(yǎng)基125mL×4A-431細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持A-431細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含A-431細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于A-431細胞的體外培養(yǎng)。

CW-2細胞專用培養(yǎng)基125mL×4CW-2細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持CW-2細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含CW-2細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CW-2細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠口腔上皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠口腔上皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠口腔上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠口腔上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠口腔上皮細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腦成纖維細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腦成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠腦成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腦成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腦成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖 (含L-丙氨酰-L-,不含酚紅)500mL-

雞小腸黏膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL雞小腸黏膜上皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞小腸黏膜上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞小腸黏膜上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞小腸黏膜上皮細胞的體外培養(yǎng)。


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