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人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:03:06瀏覽次數(shù):326

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝動(dòng)脈組織
人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CoC1人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCoC1人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCOLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCOLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCOLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝動(dòng)脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝動(dòng)脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動(dòng)脈供血,分別來(lái)源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈,這3條動(dòng)脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動(dòng)脈,大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見(jiàn)起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈(25%),起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈(10%),而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見(jiàn)。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈,如果肝臟沒(méi)有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈,如果在常見(jiàn)肝動(dòng)脈類型外,還有一支這種異位起始的動(dòng)脈的一部分血流,這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肝動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長(zhǎng)潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

核糖核L抑制蛋白抗體 泛連接封閉多肽 大鼠甲狀旁腺激(PTH)ELISA試劑盒

乳腺癌細(xì)胞3抗體 腺苷單磷活化蛋白激α2封閉多肽 大鼠組胺(HIS)試劑盒ELISA

IRE1蛋白抗體 NCK銜接蛋白2封閉多肽 大鼠白介13(IL-13)ELISA檢測(cè)試劑盒

cGMP依賴性蛋白激1抗體 半胱胺-10封閉多肽 大鼠白介15(IL-15)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2封閉多肽 大鼠白介16(IL-16)試劑盒elisa

磷化活化復(fù)制因子2抗體 血管生成2封閉多肽 大鼠白介17(IL-17)檢測(cè)試劑盒elisa

G蛋白偶聯(lián)受體釋放因子2抗體 Bax封閉多肽 大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3封閉多肽 大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)試劑盒ELISA

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體 ATP敏感鉀離子通道蛋白封閉多肽 大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA檢測(cè)試劑盒

粘著斑蛋白抗體 跨膜蛋白TMBIM1封閉多肽 大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒

SKOR1蛋白抗體 RHOG封閉多肽 大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)試劑盒elisa

磷化組蛋白去乙?;?/span>4(Ser246)抗體 磷化真核翻譯延長(zhǎng)因子2封閉多肽 大鼠17-酮類固醇(17-KS)檢測(cè)試劑盒elisa

C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體 EIF3D蛋白封閉多肽 大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒

分泌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體 鈣結(jié)合樣蛋白/神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤標(biāo)記物封閉多肽 大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒ELISA

磷化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體 跨膜蛋白62封閉多肽 大鼠白介3(IL-3)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 含脯氨突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1封閉多肽 大鼠白介5(IL-5)elisa試劑盒

脫羧蛋白體36抗體 重組人白細(xì)胞介-1β (活性的, Tag free) 大鼠苗條受體(LR/Ob-R)試劑盒elisa

粘著斑激抗體 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D型封閉多肽 大鼠瘦(LEP)檢測(cè)試劑盒elisa
人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-MB-435S人黑瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-435S細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MDA-MB-435S人黑瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-435S細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-MB-436人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-436細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MDA-MB-436人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-436細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-453細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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