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大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:54:52瀏覽次數(shù):299

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 牙周膜組織
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:羊子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105羊乳腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105羊睪丸內(nèi)膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105羊附睪上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

牙周膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內(nèi);牙周膜內(nèi)有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞(PLFs)作為牙周膜的主體細(xì)胞,是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,它不僅具有合成膠原、基質(zhì)、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在,利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 胰dan白聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

配對盒基因1抗體 重組人β2-微球蛋白蛋白 

整合樣金屬與樣3蛋白抗體 Ki67蛋白封閉多肽 

短蛋白聚糖抗體 重組人CHI3L1蛋白 

三磷腺苷依賴解旋DDX23抗體 絲/蘇氨蛋白質(zhì)激II α封閉多肽 

ELMOD2蛋白抗體 鋅指蛋白134封閉多肽 

磷化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1(CD331)抗體 粘蛋白15封閉多肽 

泛樣蛋白抗體 HTF9C蛋白封閉多肽 

二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體 DHX37蛋白封閉多肽 

KIAA1467蛋白抗體 ATP依賴RNA解旋DDX52封閉多肽 

卵透明帶糖蛋白2抗體 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1封閉多肽 

葡萄膜自身抗原Uaca抗體 血管緊張?jiān)忾]多肽 

類固醇受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC31B封閉多肽 

液泡蛋白分選蛋白28抗體 長壽相關(guān)基因lASS4封閉多肽 

防御β-108B/β-defensin 108B抗體 雄激受體相互作用蛋白4封閉多肽 

微管卷曲蛋白SYNC抗體 重組人微管相關(guān)蛋白Tau-4 

4-磷磷脂酰肌醇5激1樣蛋白抗體 磷化KLF5封閉多肽 

MX1抗體 白細(xì)胞介-7受體a封閉多肽 

蛋白激Aγ抗體 磺酰脲類藥物受體1封閉多肽 
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖 (含HEPES、雙抗,不含鈉)500mL-

Leibovitz's L-15(含L-丙氨酰-L-)500mL-

小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4MDA-MB-415細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-415細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-415細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-415細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A(不含L-)500mL-

MCF-7/Taxol細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MCF-7/Taxol細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MCF-7/Taxol細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MCF-7/Taxol細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MCF-7/Taxol細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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