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人皮層神經(jīng)元細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 12:59:47瀏覽次數(shù):345

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
人皮層神經(jīng)元細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CAOV-3人卵巢腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCAOV-3人卵巢腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCapan-1人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCapan-1人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCapan-2人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腦皮層組織;皮層神經(jīng)元細(xì)胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細(xì)胞,它由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細(xì)小分支叫做神經(jīng)末梢。細(xì)胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細(xì)胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細(xì)胞體是細(xì)胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細(xì)胞中央,染色質(zhì)少,核仁明顯。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維。細(xì)胞突起是由細(xì)胞體延伸出來的細(xì)長部分,又可分為樹突和軸突。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細(xì)胞體。每個神經(jīng)元只有一個軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細(xì)胞之一,是大腦進(jìn)行功能活動調(diào)節(jié)的基本單位,參與動物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開始;突起逐漸增多,而后突起進(jìn)一步增多并逐漸成網(wǎng),同時細(xì)胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細(xì)胞為豐滿,隨后神經(jīng)元開始裂解,突起逐漸減少,細(xì)胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細(xì)胞變形。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.125%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人皮層神經(jīng)元細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

瞬時受體電位蛋白12抗體 生長抑制DNA損傷基因45封閉多肽 大鼠膽囊收縮/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒

英文名稱: TFEB 核受體蛋白NR2E1封閉多肽 大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒ELISA

CD209b抗體 DCN1樣蛋白2封閉多肽 大鼠6酮前列腺(6-K-PG)ELISA檢測試劑盒

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 腦蛋白絲氨/蘇氨激29封閉多肽 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)elisa試劑盒

水通道蛋白5抗體 核受體輔助抑制因子1封閉多肽  大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒elisa

P物質(zhì)受體抗體 組氨性磷結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 大鼠25羥基維生D3(25(OH)D3/25HVD3)檢測試劑盒elisa

英文名稱: NMDAR1 7號染色體開放閱讀框57封閉多肽 大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒

英文名稱: Keratin 4 甲基化樣蛋白11封閉多肽(N端) 大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒ELISA

酪氨蛋白激A5受體抗體 環(huán)指蛋白12封閉多肽 大鼠維生C(VC)ELISA檢測試劑盒

相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體 腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白封閉多肽 大鼠維生B6(VB6)elisa試劑盒

腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體 多巴胺受體D2封閉多肽 大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒elisa

磷甘露糖變位1抗體 異型組蛋白H2A.2封閉多肽 大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測試劑盒elisa

Bax單克隆抗體 感光細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子TULP3封閉多肽 大鼠可溶性P選擇(sP-selectin)ELISA試劑盒

跨膜蛋白49抗體 DNA損傷關(guān)卡蛋白1封閉多肽 大鼠S100蛋白(S-100)試劑盒ELISA

甘露聚糖結(jié)合凝集絲氨肽2抗體 β葡聚糖受體封閉多肽 大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白774抗體 殺菌/通透性增強蛋白封閉多肽 大鼠白介1(IL-1)elisa試劑盒

α-(1,3)-巖藻糖基轉(zhuǎn)移 4 鋅指蛋白671封閉多肽 大鼠白介1β(IL-1β)試劑盒elisa

英文名稱: Phospho-PKC alpha (Thr638) FAM151B蛋白封閉多肽 大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)檢測試劑盒elisa
人皮層神經(jīng)元細(xì)胞LS180人結(jié)直腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LS180細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LS513細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

LS513人結(jié)直腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LS513細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

LX-2人肝星形細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LX-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

LX-2人肝星形細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LX-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

LX-2+GFP人肝星形+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LX-2+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

LX-2+GFP人肝星形+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LX-2+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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