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人微血管周細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:10:34瀏覽次數(shù):378

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 微血管組織
人微血管周細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腔靜脈外膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人食管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人食管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人食管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人微血管周細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

微血管組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自微血管組織;周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

M-期磷蛋白6抗體 軟脂?;椎鞍譙prouty1封閉多肽 小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)ELISA檢測(cè)試劑盒

核孔蛋白1抗體 PATL2蛋白封閉多肽 小鼠αL巖藻糖苷(AFU)ELISA Kit

尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白抗體 磷化粘附相關(guān)激封閉多肽 小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒

胞漿蘋果2單克隆抗體 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈封閉多肽 小鼠胰島原(PI)試劑盒 ELISA

英文名稱: phospho-Src (Tyr419) TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12封閉多肽 小鼠抗IgE受體抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD6抗體 ZDHHC13蛋白封閉多肽 小鼠抗IVIgG抗體ELISA Kit

雙同源盒蛋白A抗體 磷化酪氨激A封閉多肽 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒

核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體 SWI/SNF相關(guān)基質(zhì)關(guān)聯(lián)肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子亞家族D2封閉多肽 小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)試劑盒 ELISA

20號(hào)染色體開放閱讀框201抗體 自噬相關(guān)蛋白4C封閉多肽 小鼠p53(p53)ELISA檢測(cè)試劑盒

去整合樣金屬9抗體 脫氫13封閉多肽 小鼠環(huán)磷鳥苷(cGMP)ELISA Kit

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白3樣蛋白2封閉多肽 小鼠一氧化氮合成(NOS)ELISA試劑盒

心肌肌鈣蛋白I抗體 Wnt1信號(hào)通路蛋白3封閉多肽 小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)試劑盒 ELISA

英文名稱: GART 7號(hào)染色體開放閱讀框65封閉多肽 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒

β淀粉樣蛋白結(jié)合蛋白抗體 酪蛋白激δ1封閉多肽 小鼠組胺(HIS)ELISA Kit

前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2抗體 有絲分裂抑制缺陷蛋白1封閉多肽 小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒

MEIG1蛋白抗體 雙皮質(zhì)封閉多肽 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 ELISA

神經(jīng)顆??贵w G蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白封閉多肽 小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA檢測(cè)試劑盒

跨膜受體蛋白Notch-3單克隆抗體 Muellerian繆勒管激抑制因子封閉多肽 小鼠脂聯(lián)(ADP)ELISA Kit
人微血管周細(xì)胞兔頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:兔頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:兔大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞英文名稱:兔腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:兔腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞英文名稱:兔胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔食管上皮細(xì)胞英文名稱:兔食管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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