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小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:49:34瀏覽次數(shù):340

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 陰道組織
小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:U-937 人淋巴瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌人細(xì)胞系1×106VCAP人前列腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106WM-115人黑瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

陰道組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自分離自外膜層,成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代左右;2代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian RAB42蛋白封閉多肽 人補(bǔ)體因子D(CFD)ELISA試劑盒

整合β3/CD61抗體 OC90蛋白封閉多肽 人血漿纖維連接蛋白(pFN)試劑盒ELISA

P選擇/白細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子3抗體 藍(lán)色敏感的視色 (厚皮螺旋體) 封閉多肽 人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA檢測(cè)試劑盒

泛蛋白單克隆抗體 血清淀粉樣蛋白A樣蛋白1封閉多肽 人總蛋白S(TPS)elisa試劑盒

離子鈣接頭蛋白抗體 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白封閉多肽 人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)試劑盒elisa

磷化Bcl-2抗體 TRIM35蛋白封閉多肽 人中性粒細(xì)胞防御1-3(HNP1-3)檢測(cè)試劑盒elisa

中心體蛋白2抗體 液泡蛋白分選蛋白33B封閉多肽 人嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒

ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白15封閉多肽 人血漿抗凝蛋白S(PS)試劑盒ELISA

1號(hào)染色體開放閱讀框141抗體 重組人溶體相關(guān)膜蛋白1 人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA檢測(cè)試劑盒

乙醛脫氫1型抗體 RNA結(jié)合蛋白23封閉多肽 GFc片段(Fcγ)elisa試劑盒

三葉肽因子3抗體 磷化埃茲蛋白封閉多肽 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB)試劑盒elisa

蛋白質(zhì)酪氨激JAK2抗體 精子尾外致密纖維3樣蛋白1封閉多肽 人C4結(jié)合蛋白(C4BP)檢測(cè)試劑盒elisa

整合alpha E2(CD103)抗體 p53相關(guān)蛋白P73α封閉多肽 人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒

腸型脂肪結(jié)合蛋白抗體 脫氫激亞型2封閉多肽 人補(bǔ)體7(C7)試劑盒ELISA

透明質(zhì)介導(dǎo)細(xì)胞游走受體抗體 HEPN1蛋白封閉多肽 人補(bǔ)體7(C7)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: HLA-DPA1 MAPK/ERK激1封閉多肽 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)elisa試劑盒

Wnt信號(hào)受體蛋白抗體 過量位點(diǎn)蛋白1封閉多肽 人chemerin試劑盒elisa

磷化5-脂氧合抗體 標(biāo)簽陽性對(duì)照 (11 Tags, 41kDa)全細(xì)胞裂解液 人Ⅻ(FⅫ)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠陰道壁成纖維細(xì)胞COS-7非洲綠猴腎細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化 英文名稱:COS-71×106DMEM+10%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

MA-104恒河猴腎細(xì)胞英文名稱:MA-1041×106MEM+10%FBS+1%P/S  (非人源非鼠源種屬鑒定)

Marc145非洲綠猴胚胎腎細(xì)胞英文名稱:Marc1451×106DMEM+15%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:RF/6A1×106MEM+10%FBS+1%P/S  (非人源非鼠源種屬鑒定)

VERO 非洲綠猴腎細(xì)胞英文名稱:VERO 1×106MEM+10%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

VERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞英文名稱:VERO E61×106MEM+10%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞英文名稱:COS-11×106DMEM(含NAHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S (非人源非鼠源種屬鑒定)

 


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