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小鼠腹膜間皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 16:26:05瀏覽次數(shù):291

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腹膜組織
小鼠腹膜間皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠腎上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠膀胱間質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠甲狀腺成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胰腺星狀細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細(xì)胞構(gòu)成,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連;腹膜也具有吸收撞擊保護(hù)內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum)為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,薄而光滑,呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity)。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細(xì)胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,是覆蓋于腹膜表面的一層細(xì)胞。間皮細(xì)胞是構(gòu)成間皮的細(xì)胞,正常大小約為15-25微米,細(xì)胞常呈圓形或者卵圓形。其功用是提供潤滑,使器官與器官、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護(hù),不會互相磨損受傷。而間皮所生產(chǎn)的潤滑和保護(hù)作用就是靠間皮細(xì)胞所分泌的物質(zhì)來達(dá)成,分泌物多半為細(xì)胞外基質(zhì)、玻尿suan類物質(zhì)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合膠原消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK、Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠腹膜間皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腹膜組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化氨基末端激1/2/3抗體 CREB結(jié)合蛋白封閉多肽 

H5亞型全病毒抗體 磷化電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2封閉多肽 

英文名稱: CSNK1G2 磷化核糖體S6蛋白激封閉多肽 

驅(qū)動蛋白家族成員C2抗體 蛋白酪氨激9封閉多肽 

英文名稱: NF-H 鈣反應(yīng)因子封閉多肽 

磷化微管相關(guān)蛋白單克隆抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白19成員A1封閉多肽 

鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷抗體 MTFMT蛋白封閉多肽 

蛋白激C結(jié)合蛋白NELL2抗體 卡因和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白封閉多肽 

磷化HER4抗體 p21激活激2封閉多肽 

蛋白酪氨磷畝mu抗體 著絲粒蛋白O封閉多肽 

精子鞭毛蛋白1抗體 跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道封閉多肽 

磷化腺苷單磷活化蛋白激β1抗體 新型抑癌基因封閉多肽 

羰基還原2抗體 骨鈣蛋白/骨鈣封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激NEK9抗體 激活受體-2激活肽多肽 

上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 扭轉(zhuǎn)蛋白A封閉多肽 

鋅指蛋白234抗體 神經(jīng)內(nèi)分泌長卷曲螺旋蛋白2封閉多肽 

絲裂原活化蛋白激1(MAPK3/1)單克隆抗體 突觸后密度蛋白95封閉多肽 

TMEFF1蛋白抗體 磷化活化復(fù)制因子2封閉多肽 
小鼠腹膜間皮細(xì)胞3T3-Swiss albino細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×43T3-Swiss albino細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持3T3-Swiss albino細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含3T3-Swiss albino細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于3T3-Swiss albino細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HMy2.CIR細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HMy2.CIR細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HMy2.CIR細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HMy2.CIR細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HMy2.CIR細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠子宮平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠子宮平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠子宮平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠前列腺平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

雞心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

DMEM/F12無糖(含HEPES)500mL-

293T/17細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4293T/17細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持293T/17細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含293T/17細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293T/17細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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