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小鼠肝枯否細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:39:26瀏覽次數(shù):311

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝臟組織
小鼠肝枯否細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-436人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMDA-MB-453人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMDA-MB-468人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠肝枯否細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接??莘袷霞?xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來(lái)的抗原微粒,并能吞噬。此外,肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,參與免疫調(diào)節(jié)的作用。枯否氏細(xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同,枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或減弱抗原性的作用??莘袷霞?xì)胞能吞噬來(lái)自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害??莘窦?xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性內(nèi)毒素血癥。電鏡下有很多皺褶和微絨毛。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合灌流消化、低速離心、密度梯度離心、差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、巨噬細(xì)胞

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化葡萄糖合成1抗體 嗅蛋白封閉多肽 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒

ZC3H8蛋白抗體 小腦肽3封閉多肽 人可溶性胸苷激1(TK1)試劑盒ELISA

軸突生長(zhǎng)誘向因子4抗體 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103封閉多肽 人可溶性間皮相關(guān)肽(SMRP)ELISA檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)肽Q抗體 免疫球蛋白超家族成員5封閉多肽 人可溶性核因子κB受體活化因子(sRANK)ELISA試劑盒

異質(zhì)核糖核蛋白L抗體 磷乙醇胺轉(zhuǎn)移A封閉多肽 人可溶性前體蛋白α(sAPPα)試劑盒ELISA

唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集9抗體 周期依賴性激2封閉多肽 人可溶性彈性蛋白片段(sELAF)檢測(cè)試劑盒elisa

環(huán)指蛋白6抗體 富含半胱氨蛋白結(jié)合蛋白封閉多肽 人可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 ELISA試劑盒

patatin樣磷脂6抗體 富含嘌呤元件結(jié)合蛋白A封閉多肽 人可溶性白介7受體(sIL-7R)試劑盒ELISA

細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制劑2B抗體 同源盒基因HOXA6蛋白封閉多肽 人可溶性O(shè)X40L(sOX40L)ELISA檢測(cè)試劑盒

遲鈍蛋白家族1抗體 真核延伸因子激2封閉多肽 人可溶性Endoglin(sENG/sCD105)ELISA試劑盒

神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體 泛蛋白封閉多肽 人可溶性CD80(sCD80)試劑盒ELISA

英文名稱: phospho-Cyclin E1 (Thr77) FBXO22蛋白封閉多肽 人可溶性CD44變體9(sCD44-v9)檢測(cè)試劑盒elisa

膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體 血紅蛋白ε封閉多肽 人可溶性CD40ELISA試劑盒

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體 骨骼肌肌特異性肌鈣蛋白T-SS封閉多肽 人可溶性CD276分子(sCD276/sB7-H3)試劑盒ELISA

ELOV3蛋白抗體 有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2封閉多肽 人可溶性CD163分子(sCD163)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化磷酯Cγ1抗體 磷化蛋白激C亞性D型封閉多肽 人可溶性CD146分子(sCD146)ELISA試劑盒

膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體 鋅指蛋白70封閉多肽 人可溶性CD100(sCD100)試劑盒ELISA

電壓門(mén)控性鉀通道蛋白亞基kv6.1抗體 白介14封閉多肽 人檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠肝枯否細(xì)胞HEPA1-6+LUC小鼠肝癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEPA1-6+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HEPA1-6+LUC小鼠肝癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HEPA1-6+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HL-1小鼠心肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HL-1小鼠心肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HT-22細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:HT-22細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

ID8小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:ID8細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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