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人胰腺癌組織源細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:38:45瀏覽次數(shù):266

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胰腺癌組織
人胰腺癌組織源細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶Panc02 (小鼠胰腺癌細(xì)胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶HGF-1 (人牙齦成纖維細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶FO (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NCI-H2170 (人肺鱗癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人胰腺癌組織源細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胰腺癌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自患有胰腺癌病人的胰腺癌組織;胰腺癌是一種惡性程度很高,診斷和治療都很困難的消化道惡性腫瘤,約90%為起源于腺管上皮的導(dǎo)管腺癌。其發(fā)病率和死亡率近年來(lái)明顯上升。5年生存率<1%,是預(yù)后差的惡性腫瘤之一。胰腺癌早期的確診率不高,手術(shù)死亡率較高,而治很低。胰腺癌的病因尚不十分清楚。其發(fā)生與吸煙、飲酒、高脂肪和高蛋白飲食、過(guò)量飲用咖啡、環(huán)境污染及遺傳因素有關(guān);近年來(lái)的調(diào)查報(bào)告發(fā)現(xiàn)糖尿病人群中胰腺癌的發(fā)病率明顯高于普通人群;也有人注意到慢性胰腺炎病人與胰腺癌的發(fā)病存在一定關(guān)系,發(fā)現(xiàn)慢性胰腺炎病人發(fā)生胰腺癌的比例明顯增高;另外還有許多因素與此病的發(fā)生有一定關(guān)系,如職業(yè)、環(huán)境、地理等。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,大部分癌癥的生存率都在提高,例如乳腺癌,結(jié)直腸癌等腫瘤,近幾十年來(lái),生存率得到了大幅度的提升。但胰腺癌的生存率一直停滯不前,缺乏有效的治療方法,的死亡率使其成為“癌中",體外培養(yǎng)胰腺癌組織源細(xì)胞對(duì)研究胰腺癌的治療具有重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化、經(jīng)離心純化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

跨膜蛋白SEMA4B抗體 垂體特異性同源因子封閉多肽 

DNA 修復(fù)蛋白補(bǔ)充 XP-A 細(xì)胞抗體 醌氧化還原樣蛋白1封閉多肽 

絲氨/蘇氨蛋白激Plk2抗體 骨骼肌快/慢肌肌鈣蛋白I封閉多肽 

英文名稱(chēng): Gentamicin 中間絲家族孤啡肽1蛋白封閉多肽 

英文名稱(chēng): CD8 Kelch樣蛋白24封閉多肽 

錯(cuò)配修復(fù)蛋白3抗體 轉(zhuǎn)錄因子同源蛋白Nkx2.6封閉多肽 

降鈣基因相關(guān)肽1抗體 鋅指蛋白38封閉多肽 

卵黃狀黃斑病蛋白抗體 細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白封閉多肽 

真核翻譯起始因子1B抗體 Ras蛋白腦組織同源類(lèi)似物RHEB蛋白封閉多肽 

上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 細(xì)胞分裂周期蛋白2亞型1封閉多肽 

神經(jīng)母細(xì)胞瘤擴(kuò)增基因蛋白抗體 核小體組裝蛋白1樣蛋白4封閉多肽 

英文名稱(chēng): Integrin alpha 6 22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框36封閉多肽 

小腦肽1抗體 水通道蛋白8封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體21抗體 CD39樣蛋白2/ENTPD6封閉多肽 

抑癌蛋白AIMP3抗體 半胱氨脫硫NFS1封閉多肽 

胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白RLLM1抗體 G蛋白偶聯(lián)受體137封閉多肽 

細(xì)胞表面趨化因子受體7抗體 2號(hào)染色體開(kāi)放閱封閉多肽 

蜜蜂微孢子蟲(chóng)蛋白抗體 紅細(xì)胞膜蛋白55封閉多肽 
人胰腺癌組織源細(xì)胞小鼠虹膜色上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠表皮成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

BNL CL.2 (小鼠胚胎肝細(xì)胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

TOV-112D (人上皮性卵巢癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)42.5% MCDB105+42.5% M199+15% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

NCI-H1975 (人肺腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

4T1(小鼠乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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