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人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:53:41瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 淋巴管
人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠腹膜間皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠腸巨噬細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠gang門內(nèi)括約肌平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠腸道干細(xì)胞細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

淋巴管

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細(xì),管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達(dá),外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過一個或多個淋巴結(jié),從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。當(dāng)局部感染時,細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞再循環(huán)和機(jī)體的免疫反應(yīng)和組織液及蛋白質(zhì)的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴(kuò)散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結(jié)核。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用中性dan白消化法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

水通道蛋白5抗體 α-甘露糖苷2x封閉多肽 

螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體 凋亡抑制因子5封閉多肽 

英文名稱: Bad CD44封閉多肽 

細(xì)胞色P450 A7抗體 雌激受體α封閉多肽 

Cy5標(biāo)記小鼠抗人CD22單克隆抗體 SND1蛋白封閉多肽 

彈性蛋白抗體 四分子交聯(lián)體6封閉多肽(四旋蛋白) 

N-甲基轉(zhuǎn)移抗體 微粒體S轉(zhuǎn)移1封閉多肽 

皮質(zhì)胸腺細(xì)胞樣蛋白VSIG2抗體 β淀粉樣前體蛋白裂解2封閉多肽 

甘胺-N-?;D(zhuǎn)移樣1抗體 同源盒蛋白NOBOX封閉多肽 

肌球蛋白重鏈1抗體 ATP依賴解旋SMARCA2封閉多肽 

英文名稱: alpha Estradiol 叉頭蛋白B1+B2封閉多肽 

環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗體 體PSMα1封閉多肽 

鋅指蛋白256抗體 轉(zhuǎn)錄因子LHX6封閉多肽 

S轉(zhuǎn)移M5抗體 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子封閉多肽 

尿皮質(zhì)UCN3抗體 MAB21L1蛋白封閉多肽 

間隙連接蛋白40抗體 腎上腺發(fā)育不全相關(guān)蛋白封閉多肽 

神經(jīng)降壓抗體 微小染色體維持缺陷蛋白4封閉多肽 

肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體 20號染色體開放閱讀框117封閉多肽 
人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞原代精原細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代精原細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代內(nèi)膜細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代腎足細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代腎足細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代腎足細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代腎足細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL


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