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人心臟纖維原細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 心臟組織
人心臟纖維原細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLRAW 264.7小鼠單核巨噬白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLRAW 264.7小鼠單核巨噬白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLRAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬白血病+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLRAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬白血病+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自心臟組織;心臟由心肌細(xì)胞和非心肌細(xì)胞組成,非心肌細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的70%,其中90%以上的非心肌細(xì)胞由心肌成纖維細(xì)胞組成。纖維細(xì)胞是機(jī)能不活躍的成纖維細(xì)胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達(dá)。當(dāng)組織受損時(shí),纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為成纖維細(xì)胞而參與修復(fù)過程。纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細(xì)胞,如在組織損傷后的修復(fù)過程中,纖維細(xì)胞可轉(zhuǎn)化為功能活躍的成纖維細(xì)胞。纖維細(xì)胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復(fù)合體不發(fā)達(dá)。成纖維細(xì)胞較大,呈星形或梭形,有突起,細(xì)胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細(xì)胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細(xì)胞主要功能為對心肌細(xì)胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負(fù)責(zé)細(xì)胞基質(zhì)外的合成,當(dāng)心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細(xì)胞是心臟結(jié)締組織中常見的細(xì)胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機(jī)基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細(xì)胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細(xì)胞,其功能活動(dòng)也得以恢復(fù),參與組織損傷后的修復(fù)。因此,對心肌成纖維細(xì)胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化結(jié)合差速貼壁法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人心臟纖維原細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化埃茲蛋白抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子IIF亞基2/TFIIF RAP 30封閉多肽 人肽酰脯氨酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒

英文名稱: Aflatoxin B1 胞苷尿苷鳥苷結(jié)合蛋白1/2,神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)RNA結(jié)合蛋白封閉多肽 人肽酰脯氨酰異構(gòu)(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)試劑盒 ELISA

亮氨腦啡肽抗體 促凋亡Bik蛋白封閉多肽 人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)ELISA檢測試劑盒

C-SKI抗體 磷化β 連環(huán)蛋白封閉多肽 人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化(ACEⅠ)ELISA Kit

核突觸蛋白α抗體 SETD6蛋白封閉多肽 人(AP)ELISA試劑盒

線粒體核糖體蛋白L46抗體 蛋白酪氨磷PTPLB封閉多肽 人胱天12(Casp-12)試劑盒 ELISA

雙皮層蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白DCDC2抗體 鐵蛋白Fe65樣蛋白1封閉多肽 人胱天12(Casp-12)ELISA檢測試劑盒

丙型肝炎病毒NS5A激活蛋白9抗體 KIAA2013蛋白封閉多肽 人蛋白激A(PKA)ELISA Kit

HERC4 E3泛蛋白連接抗體 外周髓鞘蛋白-22封閉多肽 人解整合樣金屬10(ADAM10) ELISA試劑盒

EML2蛋白抗體 睪丸特異性堿性蛋白Y2封閉多肽 人基質(zhì)金屬11(MMP11)試劑盒 ELISA

RNA結(jié)合蛋白X-連鎖蛋白2抗體 2型豬鏈球菌菌體蛋白 人胸苷合成(TS)ELISA檢測試劑盒

乙?;M蛋白H2B K5抗體 谷丙轉(zhuǎn)氨2封閉多肽 人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)ELISA Kit

鋅指同源盒蛋白4抗體 11-β-羥基類固醇脫氫3封閉多肽 人多聚ADP核糖聚合(PARP)ELISA試劑盒

T淋巴細(xì)胞活化蛋白樣蛋白MRFAP1L1抗體 甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域3封閉多肽 人葡萄糖激(GCK)試劑盒 ELISA

跨膜蛋白TMEM176B抗體 親環(huán)蛋白ppil4封閉多肽 人單胺氧化(MAO)ELISA檢測試劑盒

富含亮氨重復(fù)蛋白10抗體 磷化組蛋白H2AX封閉多肽 人胞漿型磷脂A2(cPLA2)ELISA Kit

英文名稱: 4 Hydroxynonenal 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21封閉多肽 人二胺氧化(DAO)ELISA試劑盒

乳腺癌易感基因復(fù)合物亞基蛋白3抗體 Phosducin 樣蛋白封閉多肽 人環(huán)加氧2(COX-2)試劑盒 ELISA
人心臟纖維原細(xì)胞大鼠肝星狀細(xì)胞英文名稱:大鼠肝星狀細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠肝Kupffer細(xì)胞英文名稱:大鼠肝Kupffer細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱:大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠肝間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:大鼠肝間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠肝成纖維細(xì)胞英文名稱:大鼠肝成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠腸間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:大鼠腸間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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