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人腎足突細胞

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更新時間:2023-04-21 13:36:36瀏覽次數(shù):261

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
人腎足突細胞的相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLlovo人結(jié)直腸癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLlovo人結(jié)直腸癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLLOVO/5FU人結(jié)直腸癌氟耐藥株細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLLOVO/5FU人結(jié)直腸癌氟耐藥株細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腎組織;腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞(podocyte)即腎小囊臟層上皮細胞,它附著于腎小球基底膜(GBM)的外側(cè),連同GBM和毛細血管內(nèi)皮一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置,使得其體內(nèi)研究較為困難;又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞,體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀,胞體較大,由胞體伸出許多突起,又稱足突(FP),呈指狀交叉復蓋于GBM外表面,并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分,IV型膠原和纖維連接蛋白(FN);在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質(zhì)金屬dan白(MMPs)和組織dan白,從而在GBM的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替,形成了許多30-40nm的裂孔,孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜,即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統(tǒng)的后屏障,對于維持腎小球濾過屏障結(jié)構(gòu)與功能完整性發(fā)揮關(guān)鍵作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩結(jié)合膠原消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人腎足突細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腎組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

β防御3抗體 細胞色c氧化1封閉多肽 人前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒

GDF5OS蛋白抗體 肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3封閉多肽 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)試劑盒ELISA

吲哚胺2,3-雙加氧抗體 迪格弗-梅爾基奧爾-克勞森綜合征相關(guān)蛋白封閉多肽 人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)ELISA檢測試劑盒

RAS相關(guān)/干擾蛋白2抗體 G蛋白γ5/Gγ5 封閉多肽 人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)ELISA試劑盒

抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 cereblon蛋白封閉多肽 人破傷風(Tetanus)抗體(IgG)試劑盒ELISA

a-包襯蛋白抗體 MGAT4C蛋白封閉多肽 人蘋果脫氫1(MDH1)檢測試劑盒elisa

肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移1B抗體 Bcl2樣凋亡蛋白14封閉多肽 人平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA試劑盒

英文名稱: LMO4 細胞色c氧化11封閉多肽 人嘌呤核苷磷化(PNP)試劑盒ELISA

轉(zhuǎn)錄延伸因子B2抗體 舞蹈癥相關(guān)相互作用蛋白1/雌激相關(guān)受體樣蛋白1封閉多肽 人皮質(zhì)抑/穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA檢測試劑盒

甲基化樣蛋白21C抗體 RAS癌基因家族蛋白RAB40B封閉多肽 人皮質(zhì)-3(Cortxin-3)ELISA試劑盒

鼻咽癌癌基因抗體 Thimet內(nèi)肽封閉多肽 人皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(CBG)試劑盒ELISA

Tristetraprolin抗體 6號染色體開放閱讀框174封閉多肽 人皮動蛋白(CTTN)檢測試劑盒elisa

雞新城疫融合糖蛋白F2 血栓調(diào)節(jié)蛋白封閉多肽 人泡狀過表達癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA試劑盒

血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 SEMCAP3蛋白封閉多肽 人排序連接蛋白3(SNX3)試劑盒ELISA

Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體 枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑封閉多肽 人偶聯(lián)因子6(CF6)ELISA檢測試劑盒

細胞維甲結(jié)合蛋白1抗體 5-羥色胺受體3封閉多肽 人牛奶過敏原特異性IgE抗體ELISA試劑盒

跨膜γ羧基蛋白4抗體 STOX1蛋白封閉多肽 人牛兒基焦磷合(GGPS1)試劑盒ELISA

GLIS2蛋白抗體 鋅指蛋白782封閉多肽 人XIIIB鏈(F13B)檢測試劑盒elisa
人腎足突細胞4T1小鼠乳腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:4T1細胞專用培養(yǎng)基500ML

4T1+luc小鼠乳腺癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:4T1+luc細胞專用培養(yǎng)基125ML

4T1+luc小鼠乳腺癌熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:4T1+luc細胞專用培養(yǎng)基500ML

AML-12小鼠肝實質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AML-12細胞專用培養(yǎng)基125ML

AML-12小鼠肝實質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:AML-12細胞專用培養(yǎng)基500ML

Ana-1小鼠巨噬細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Ana-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

Ana-1小鼠巨噬細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Ana-1細胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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