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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 組織來源 | 外周血 |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 外周血 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡介：
分離自外周血，由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞，典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則，表面皺褶多，亦可見少量短刺狀突，胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡，具有較強(qiáng)的遷移能力，伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成，多數(shù)呈懸浮生長， 細(xì)胞呈圓形，細(xì)胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志，主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答，處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)；未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答，不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào)，可導(dǎo)致T細(xì)胞無能，從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低，一般在30%以下。
5.方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形，樹突狀
傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
磷化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 環(huán)指蛋白128封閉多肽 人周期依賴性激2(CDK-2)ELISA試劑盒
白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2封閉多肽 人周期依賴性激1(CDK-1) 試劑盒 ELISA
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 長波長敏感的視蛋白封閉多肽 人磷化腺苷活化蛋白激(AMPK)ELISA檢測(cè)試劑盒
THUMPD1蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體γ3封閉多肽 人乳脫氫(LDH) ELISA Kit
磷化細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體 磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1 人解整合樣金屬9(ADAM9)ELISA試劑盒
細(xì)胞因子受體樣因子3抗體 7號(hào)染色體開放閱讀框44封閉多肽 人β位淀粉樣前體蛋白裂解2(BACE2)試劑盒 ELISA
同源三聚體鋅指蛋白ZHX3抗體 胞漿動(dòng)力蛋白輕鏈2封閉多肽 人核苷磷化1(UPP1)ELISA檢測(cè)試劑盒
FAM122C蛋白抗體 MICAL3蛋白封閉多肽 人乙醇脫氫(ADH)ELISA Kit
磷化胰島受體底物2抗體 神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT封閉多肽 人乙醛脫氫(ALDH)ELISA試劑盒
鋅指蛋白ZGPAT抗體 DNAJB7蛋白封閉多肽 人Rho家族GTP1(RND1)試劑盒 ELISA
細(xì)胞生長調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體 組織相容性復(fù)合物1A1封閉多肽 人受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激2(RIPK2)ELISA檢測(cè)試劑盒
磷化B-Raf抗體 微粒體S轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人磷脂爬行1(PLSCR1)ELISA Kit
胎盤葉受體蛋白2抗體 重組人FGFR4蛋白 人3-羥基-3-甲基戊二酰合1(HMGCS1)ELISA試劑盒
溶血磷脂受體蛋白1/EDG2抗體 鋅指蛋白378封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員12(EAR12)試劑盒 ELISA
英文名稱: CYP26A1 嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白封閉多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員3(EAR3)ELISA檢測(cè)試劑盒
促胃泌釋放肽抗體 β淀粉樣肽1-40（突變型）多肽 人嗜性白血球相關(guān)之RNA水解酵家族成員2(EAR2)ELISA Kit
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian FAM188B蛋白封閉多肽 人二氫嘧啶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒
ATP依賴性解旋ATRX抗體 硫軟骨N-乙酰氨半乳糖胺基轉(zhuǎn)移1封閉多肽 人色氨酰tRNA合成(WARS)試劑盒 ELISA
小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)大鼠食管成纖維細(xì)胞英文名稱：大鼠食管成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞英文名稱：大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠胃平滑肌細(xì)胞英文名稱：大鼠胃平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠胃成纖維細(xì)胞英文名稱：大鼠胃成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞英文名稱：大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠小腸平滑肌細(xì)胞英文名稱：大鼠小腸平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞英文名稱：大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
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