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小鼠睪丸支持細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:49:28瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 睪丸組織
小鼠睪丸支持細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔牙齦上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔鞏膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔鼻腔粘膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔眼外肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠睪丸支持細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

睪丸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自睪丸;睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞,在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形,細(xì)胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架,為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì),能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白,為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等,還具有構(gòu)成血-睪屏障,形成睪丸內(nèi)微環(huán)境,調(diào)節(jié)精子發(fā)生等功能。睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞,能分泌多種生長因子和免疫抑制因子,不僅可為精子提供營養(yǎng)支持和免疫保護(hù),也能對其他細(xì)胞,如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營養(yǎng)支持,而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時(shí),也能夠?yàn)檫@些細(xì)胞提供免疫保護(hù),提高植活率。因此,睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價(jià)值,而且在精子發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化原癌基因酪氨蛋白激Yes1抗體 鋅指蛋白195封閉多肽 

磷化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 

磷化KB抑制蛋白激α抗體 黑色瘤生長刺激活性蛋白α/GROa封閉多肽 

英文名稱: Flag Tag 磷化絲/蘇氨蛋白激Plk1封閉多肽 

ZCCHC5蛋白抗體 癌癥亮氨拉鏈下調(diào)因子1樣蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體 CDK5激活結(jié)合蛋白1封閉多肽 

人微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 KBTBD7蛋白封閉多肽 

芳香基硫酯K抗體 同源盒蛋白PKNOX1封閉多肽 

B4GALT6抗體 γ-谷氨酰羧化封閉多肽 

溶質(zhì)載體蛋白家族43成員2抗體 重組人CD122/IL2RB蛋白 

層粘蛋白α3抗體 纖維連接蛋白封閉多肽 

PWP2H蛋白抗體 背板膠質(zhì)乙酰酯封閉多肽 

雙特異性磷抗體15抗體 泛樣蛋白Sumo2/3封閉多肽 

精子發(fā)生相關(guān)蛋白18抗體 CD44封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框106抗體 G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 

E3泛蛋白連接COP1抗體 FAM73B蛋白封閉多肽 

整合α7抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2封閉多肽 

磷化原癌基因蛋白18抗體 超氧化物歧化1封閉多肽 
小鼠睪丸支持細(xì)胞L-WRN細(xì)胞專用培養(yǎng)基(新引進(jìn))125mL×4L-WRN細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持L-WRN細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含L-WRN細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于L-WRN細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基400mL人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基專門為人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化而開發(fā),針對人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂分化效果。本產(chǎn)品含血清成分,僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基 ADP1:成分名稱添加體積人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化誘導(dǎo)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 ADP1175mLFBS20mL Glutamine2mL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL胰島 Insulin400μLIBMX200μL Rosiglitazone200μL Dexamethasone200μL人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基 ADP2(維持培養(yǎng)基):成分名稱添加體積人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化誘導(dǎo)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 ADP2175mLFBS20mL Glutamine2mL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL胰島 Insulin400μL染色劑油紅-O染色液                                                      10ML      注:各成分請根據(jù)試劑管上標(biāo)簽標(biāo)示溫度保存。

小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SUM149PT細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SUM149PT細(xì)胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SUM149PT細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SUM149PT細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SUM149PT細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

McCoy's 5A(不含酚紅,含HEPES)500mL-

RPMI-1640 (Dutch改良)(不含葉、HEPES)500mL-

LNCaP clone FGC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4LNCaP clone FGC細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持LNCaP clone FGC細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含LNCaP clone FGC細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于LNCaP clone FGC細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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