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人外周血白細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:01:31瀏覽次數(shù):293

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 外周血
人外周血白細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:F56人腺癌細(xì)胞系人細(xì)胞系1×106FADu 人咽鱗癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106GBC-SD 人膽囊癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106GBC-SD+LUC 人膽囊癌細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱(chēng)為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞(Leukocyte),舊稱(chēng)白血球,血液中的一類(lèi)細(xì)胞。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)特殊顆粒,可將其分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。前者常簡(jiǎn)稱(chēng)為粒細(xì)胞,根據(jù)其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞,白細(xì)胞也通常被稱(chēng)為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到,血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少,具有細(xì)胞核;其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人外周血白細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

外周血

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN1抗體 細(xì)胞角蛋白10封閉多肽 人細(xì)胞周期D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒

c-fos單克隆抗體 磷化致癌基因C-Myc封閉多肽 人細(xì)胞周期D2(Cyclin-D2)ELISA高試劑盒ELISA

視桿細(xì)胞相關(guān)蛋白MREG抗體 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白封閉多肽 人細(xì)胞周期D1(Cyclin-D1)ELISA檢測(cè)試劑盒

半胱氨抗體 細(xì)胞角蛋白12封閉多肽 人內(nèi)皮抑(ES)elisa試劑盒

英文名稱(chēng): ERK5 吲哚-3-乙-牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人鐵蛋白(FE)試劑盒elisa

軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1/GDF 5抗體 FSP-1封閉多肽 人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)檢測(cè)試劑盒elisa

脯氨酰羧肽抗體 Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATPα1封閉多肽 人基質(zhì)金屬組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

Bax單克隆抗體 重組人TGF β-1 (活性的, Tag free) 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)試劑盒ELISA

細(xì)胞色P450 2D6抗體 p66 α蛋白封閉多肽 人組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測(cè)試劑盒

半胱胺蛋白-12抗體 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13封閉多肽 人肺癌標(biāo)志物elisa試劑盒

磷脂酰肌醇激(PI3Kβ)抗體 p66β蛋白封閉多肽 人胃癌標(biāo)志物試劑盒elisa

Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體 NADH復(fù)合體1封閉多肽 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)檢測(cè)試劑盒elisa

N-鈣粘附分子抗體 染色盒同源物4封閉多肽 人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒

細(xì)胞色P450 11A1抗體 TPRX1蛋白封閉多肽 人胃腸癌標(biāo)志物CA199試劑盒ELISA

腫瘤/睪丸抗原112抗體 溶質(zhì)載體家族23成員2封閉多肽 人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)干細(xì)胞抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體 離子通道蛋白Kv1.3封閉多肽 人卵巢癌標(biāo)志物CA125elisa試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian SBDN蛋白封閉多肽 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒elisa

整合α3抗體 腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白封閉多肽 人癌胚抗原(CEA/CD66)檢測(cè)試劑盒elisa
人外周血白細(xì)胞HELA 人子宮頸癌細(xì)胞英文名稱(chēng):HELA 1×106MEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

HELA+LUC  人宮頸癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱(chēng):HELA+LUC  1×106MEM+10%FBS+1%P/S提供HELA細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

HET-1A人食管上皮細(xì)胞英文名稱(chēng):HET-1A1×106BEGM kit(九管因子)+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

chang liver人宮頸癌細(xì)胞英文名稱(chēng):chang liver1×106 MEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞英文名稱(chēng):HeLa.S31×106F12K+10%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

hepg2.2.15人肝癌細(xì)胞英文名稱(chēng):hepg2.2.151×106MEM+10%FBS+0.38mg/ml G418+1%P/S 提供HEPG2細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝癌細(xì)胞英文名稱(chēng):Hep3B2.1-7 [Hep3B] 1×106MEM+10%FBS+1% L-+1%NEAA+1%鈉 +1%P/S提供STR鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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