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人胎盤絨毛膜細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:50:56瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 胎盤組織
人胎盤絨毛膜細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠食管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠食管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚(yú)類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱初級(jí)干絨毛。胚外中胚層長(zhǎng)入初級(jí)干絨毛的中軸,使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí),次級(jí)干絨毛改稱三級(jí)干絨毛。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-DNA聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)hCG免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人胎盤絨毛膜細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胎盤組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

FGD6蛋白抗體 轉(zhuǎn)化相關(guān)基因MED11封閉多肽 雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA檢測(cè)試劑盒

SAPS結(jié)構(gòu)域家族2抗體 FLJ40504蛋白封閉多肽 雞α干擾(IFN-α) ELISA Kit

英文名稱: SCE1 重組人Rho GTP激活蛋白24 雞白介18(IL-18) ELISA試劑盒

S100鈣結(jié)合蛋白ζ抗體 磷脂酰肌醇結(jié)合網(wǎng)格蛋白組裝蛋白封閉多肽 雞白介1(IL-1) 試劑盒 ELISA

α型-過(guò)氧化活化增生受體單克隆抗體 生殖細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2封閉多肽 雞病毒性腸炎病毒(DEV) ELISA檢測(cè)試劑盒

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 G蛋白偶聯(lián)受體153封閉多肽 雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA Kit

英文名稱: phospho-AMPK alpha 1 (Ser496) 血管生成樣蛋白2封閉多肽 雞白介9(IL-9)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)胺2抗體 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3封閉多肽 雞白介3(IL-3)試劑盒 ELISA

蛋白激AKT底物1抗體 原肌球蛋白調(diào)節(jié)蛋白1封閉多肽 雞白血病抑制因子(LIF) ELISA檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白596抗體 T淋巴細(xì)胞激活蛋白封閉多肽 雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1) ELISA Kit

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 磷化蛋白激A受體2α亞基封閉多肽 雞C反應(yīng)蛋白(CRP) ELISA試劑盒

磷肌醇結(jié)合蛋白1抗體 ABH5蛋白封閉多肽 雞血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF) 試劑盒 ELISA

腦瘤相關(guān)基因抗體 磷化FMS樣酪氨激3封閉多肽 雞免疫球蛋白G(IgG) ELISA檢測(cè)試劑盒

DNA解旋HEL308蛋白抗體 G蛋白偶聯(lián)受體171封閉多肽 雞堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF) ELISA Kit

視網(wǎng)膜前神經(jīng)折疊同源框蛋白抗體 脫碘2封閉多肽 雞可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒

英文名稱: Villin (ready to ues) 促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子受體1封閉多肽 雞可溶性E選擇(sE-selectin) 試劑盒 ELISA

磷脂C1樣蛋白抗體 重組人膜粘連蛋白5 雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF) ELISA檢測(cè)試劑盒

載脂蛋白H抗體 重組2奧密克戎變異株S-ECD三聚體蛋白 雞胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1) ELISA Kit
人胎盤絨毛膜細(xì)胞原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代周細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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