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大鼠表皮角化細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:00:50瀏覽次數(shù):297

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 皮膚組織
大鼠表皮角化細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy926人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞人細(xì)胞系1×106Eca-109人食管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106ECV-304人膀胱癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106EJ-1[EJ1]人膀胱癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106ES-2人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠表皮角化細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞(KC)是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分,在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中,分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層,少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移,細(xì)胞的分化程度逐漸增加,并喪失分裂活性。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 鋅指脂蛋白-1c封閉多肽 人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA試劑盒

雙皮質(zhì)抗體 基質(zhì)金屬13封閉多肽 人肝癌抗原(PHC)試劑盒ELISA

白介2受體β鏈(CD122)抗體 磷化核糖體S6K2蛋白激封閉多肽 人凋亡激活因子1(Apaf-1)ELISA檢測(cè)試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白21封閉多肽 人鼻咽癌(NPC)elisa試劑盒

14-3-3蛋白單克隆抗體 血管假性血友病因子/血管性血友病因子封閉多肽 人膀胱癌抗原(UBC)試劑盒elisa

NK細(xì)胞受體2D(CD314)抗體 甘油二酯激β/DGK-β封閉多肽 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)檢測(cè)試劑盒elisa

英文名稱: CD3G 二氫葉還原樣1封閉多肽 人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-ablELISA試劑盒

英文名稱: PICK1 磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激封閉多肽 人膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒ELISA

磷二酯4B抗體 二酰基甘油?;D(zhuǎn)移2樣蛋白6封閉多肽 人中期因子(MK)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體 濾泡型轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/II型慢性淋巴性白血病封閉多肽 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)elisa試劑盒

RNA結(jié)合蛋白56抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白8B封閉多肽 人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒elisa

蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體 嗅覺(jué)受體5V1封閉多肽 人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)檢測(cè)試劑盒elisa

INT11蛋白抗體 白細(xì)胞共同抗原封閉多肽 人色上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

英文名稱: CD23 KAZALD1蛋白封閉多肽 人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒ELISA

多腺苷二磷多聚16抗體 凋亡抑制因子IASPP封閉多肽 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA檢測(cè)試劑盒

腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體 富含精氨/絲氨剪切因子17A封閉多肽 人黑色細(xì)胞抗體(MCAb)elisa試劑盒

微管蛋白β5抗體 酪氨蛋白激受體B4封閉多肽 人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒elisa

少突細(xì)胞髓磷脂糖蛋白抗體 硫軟骨N-乙酰氨半乳糖胺基轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人P53(P53)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠表皮角化細(xì)胞HCT-15/Taxol人結(jié)直腸癌耐藥株英文名稱:HCT-15/Taxol1×1061640+10%FBS+1%P/S+500ng/ml 提供HCT15鑒定報(bào)告

HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞英文名稱:HCT-81×106 1640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞英文名稱:HEC-1-A1×106McCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞英文名稱:HEC-1-B1×106MEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HEK-293(293)人胚腎細(xì)胞英文名稱:HEK-293(293)1×106MEM+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

HEK-293A人胚腎細(xì)胞英文名稱:HEK-293A1×106DMEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:HEL1×1061640+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

 


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