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大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 08:40:19瀏覽次數(shù):269

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 主動脈組織
大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔脊髓成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔嗅鞘細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔嗅球神經(jīng)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔海馬神經(jīng)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

主動脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自主動脈組織;主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。主動脈平滑肌細(xì)胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細(xì)胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機制是目前研究的熱點;體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

黑色瘤相關(guān)抗原8抗體 轉(zhuǎn)運蛋白SEC61β亞基封閉多肽 

肌細(xì)胞生成抗體 磷脂patatin樣域包含蛋白8封閉多肽 

神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白PHOX2B抗體 磷化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2封閉多肽 

甲基固醇羥化單加氧1抗體 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4封閉多肽 

β2-微球蛋白單克隆抗體 神經(jīng)肽Y1受體封閉多肽 

磷化蓬亂蛋白2抗體 EXOC1蛋白封閉多肽 

生長因子受體結(jié)合適應(yīng)蛋白抗體 NFAM1封閉多肽 

胞內(nèi)接頭蛋白P14抗體 肌動蛋白結(jié)合蛋白2A封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框67抗體 8號染色體開放閱讀框K29封閉多肽 

卵泡刺激結(jié)合蛋白1抗體 成蛋白相關(guān)蛋白1封閉多肽 

英文名稱: Caspase-9 LEPREL1蛋白封閉多肽 

環(huán)指蛋白40抗體 鋅指蛋白783封閉多肽 

英文名稱: PPAR gamma FAM155A蛋白封閉多肽 

透明質(zhì)4抗體 胞漿型磷脂A2封閉多肽 

磷化蛋白酪氨磷2抗體 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5封閉多肽 

線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位抗體 細(xì)胞色B還原1封閉多肽 

細(xì)胞色P450 2J2抗體 性發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子蛋白DMO封閉多肽 

短鏈脫氫/還原家族7C抗體 RAS互動/干擾蛋白1封閉多肽 
大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

CoC1/DDP細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4CoC1/DDP細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持CoC1/DDP細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含CoC1/DDP細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CoC1/DDP細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SNB-19細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SNB-19細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SNB-19細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SNB-19細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SNB-19細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠胚胎成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠胚胎成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠胚胎成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠脂肪細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脂肪細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HSPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HSPC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HSPC-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HSPC-1細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HSPC-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于L5178Y TK+/- clone(3.7.2C)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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