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大鼠晶狀體上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:52:02瀏覽次數(shù):241

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 晶狀體組織
大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:NPC/HK-1人鼻咽癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLNthy-ori 3-1人甲狀腺正常細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLNthy-ori 3-1人甲狀腺正常細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLOCI-AML3人急性髓性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLOCI-AML3人急性髓性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞分開;因而,晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無(wú)神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過(guò)程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長(zhǎng)而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。研究表明,晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長(zhǎng)因子的調(diào)控,包括表皮生長(zhǎng)因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長(zhǎng)、連成膜狀。晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長(zhǎng)規(guī)律的主要手段。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

晶狀體組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白1抗體 腫瘤抑制基因LATS1封閉多肽 人低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒

ATP依賴RNA解旋DDX47抗體 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α封閉多肽 人低氧誘導(dǎo)因子2(HIF-2)試劑盒ELISA

細(xì)胞間粘附分子-2(CD102)抗體 核自身抗原SP140封閉多肽 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒

趨化樣因子受體1抗體 HEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白1蛋白封閉多肽 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)抗體(IgG)ELISA試劑盒

磷化組蛋白H3抗體 環(huán)指蛋白16封閉多肽 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)試劑盒ELISA

骨鈣蛋白/骨鈣抗體 耳聾相關(guān)蛋白NSRD9封閉多肽 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)檢測(cè)試劑盒elisa

心臟蛋白磷1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子封閉多肽 人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)ELISA試劑盒

FBLL1蛋白抗體 鋅指蛋白33A封閉多肽 人登革熱(DF)抗體(IgG)試劑盒ELISA

樣蛋白4抗體 肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin封閉多肽 人的牛血清白蛋白(BSA)ELISA檢測(cè)試劑盒

致死因子惡性腦瘤樣蛋白1抗體 細(xì)胞周期基因1蛋白封閉多肽 人蛋白水解誘導(dǎo)因子/皮離蛋白(PIF/DCD)ELISA試劑盒

磷化細(xì)胞死亡調(diào)解子抗體 BRD2蛋白封閉多肽 人體(prosome,macropain)亞基,β型,2(PSMB2)試劑盒ELISA

腺瘤樣息肉抗體 蛋白C激活肽封閉多肽 人體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)檢測(cè)試劑盒elisa

N-乙酰半乳糖胺糖蛋白3、β-半乳糖轉(zhuǎn)移1抗體 鋅指蛋白281封閉多肽 人激活復(fù)合體亞基2(PSME2)ELISA試劑盒

溶質(zhì)載體家族25成員2抗體 核仁磷蛋白2封閉多肽 人3(PR3)試劑盒ELISA

LANCL3蛋白抗體 果糖-2,6-二磷2/磷果糖激2封閉多肽 人蛋白磷2(2A),催化亞基,β亞型(PPP2CB)ELISA檢測(cè)試劑盒

葡萄糖6磷α/G6Pase-α抗體 MID1相互作用蛋白1封閉多肽 人蛋白酪氨磷自身抗體ELISA試劑盒

相互作用蛋白FHL2抗體 G蛋白偶聯(lián)受體γ4封閉多肽 人蛋白酪氨磷1B(PTP1B)試劑盒ELISA

LMBRD2蛋白抗體 GAGE2A蛋白封閉多肽 人蛋白聚糖4(PRG4)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠晶狀體上皮細(xì)胞PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PC12高分化細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 高分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PC12高分化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PC12未分化細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻瘤 未分化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PC12未分化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:RBL-2H3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:RBL-2H3細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

RH-35大鼠肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:RH-35細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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