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兔子宮平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:41:34瀏覽次數(shù):271

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 子宮組織
兔子宮平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人牙周膜干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人牙髓干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人口腔黏膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人牙齦成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人角膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔子宮平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

子宮組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結(jié)締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能,收縮受激素的調(diào)節(jié),其收縮活動有助于精子向輸卵管運(yùn)送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細(xì)胞過度生長,勢必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機(jī)制。子宮平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。子宮平滑肌細(xì)胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),在孕期能大化的擴(kuò)張子宮容積,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細(xì)胞有收縮舒張能力,在生產(chǎn)時(shí)能形成生理性的縮腹環(huán),推動胎兒向下移動,輔助生產(chǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

異戊烯焦磷1抗體 白介-17C封閉多肽 大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒

羥類固醇脫氫17β3抗體 TRIM27蛋白封閉多肽 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)試劑盒 ELISA

N-甲酰肽受體3抗體 乙酰化組蛋白H3封閉多肽 大鼠β細(xì)胞(BTC) ELISA檢測試劑盒

多腺苷二磷多聚抗體 單氨氧化A封閉多肽 大鼠血管生成2(ANG-2)ELISA Kit

癌基因蛋白抑瘤M抗體 磷化谷氨受體2B封閉多肽 大鼠血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒

英文名稱: TIA1 重組2 Spike蛋白RBD 大鼠血管生長(ANG)試劑盒 ELISA

Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD34單克隆抗體 腎小球細(xì)胞粘附分子受體封閉多肽 大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒

DCN1樣蛋白4抗體 頭發(fā)角蛋白KRT33B封閉多肽 大鼠(cAMP)ELISA Kit

軸突蛋白2抗體 糖皮質(zhì)激受體DNA結(jié)合因子1封閉多肽 大鼠(cAMP)ELISA試劑盒

促腎上腺皮質(zhì)激ACTH (7-23)抗體 氨基末端激1/3封閉多肽 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 ELISA

磷化離子型谷氨受體1抗體 雙亮氨拉鏈激DLK封閉多肽 大鼠白介9(IL-9)ELISA檢測試劑盒

磷化磷脂酰肌醇激抗體 DNAJC28蛋白封閉多肽 大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA Kit

英文名稱: Human S100B 無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣封閉多肽(迪格奧爾格綜合征) 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒

細(xì)胞角蛋白19,17,14,42,10抗體 發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子-5封閉多肽 大鼠孕激/孕酮(PROG)試劑盒 ELISA

KIAA0247蛋白抗體 互養(yǎng)蛋白3封閉多肽 大鼠雌激(E)ELISA檢測試劑盒

磷化p21激活激3抗體 能量平衡相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106) ELISA Kit

轉(zhuǎn)錄因子EYA1抗體 神經(jīng)生長因子4/5封閉多肽 大鼠白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒

L-組氨脫羧抗體 氨基?;?樣蛋白2封閉多肽 大鼠脂聯(lián)(ADP)試劑盒 ELISA
兔子宮平滑肌細(xì)胞羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

羊睪丸內(nèi)膜成纖維細(xì)胞英文名稱:羊睪丸內(nèi)膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

羊附睪上皮細(xì)胞英文名稱:羊附睪上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

羊骨骼肌細(xì)胞英文名稱:羊骨骼肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

牛骨骼肌細(xì)胞英文名稱:牛骨骼肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

牛脂肪干細(xì)胞英文名稱:牛脂肪干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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