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雞卵泡顆粒細(xì)胞

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更新時間:2023-04-20 21:01:21瀏覽次數(shù):238

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 雞卵泡組織
雞卵泡顆粒細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞大鼠肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠腹腔巨噬細(xì)胞大鼠腹膜間皮細(xì)胞大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠肺泡巨噬細(xì)胞大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱規(guī)格組織來源
雞卵泡顆粒細(xì)胞5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶雞卵泡組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔,內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形,胞質(zhì)清亮,胞核圓形,細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管,外膜細(xì)胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞,在卵泡開始發(fā)育、卵細(xì)胞成長的同時,周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮?fù)層,因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒,故稱為顆粒細(xì)胞。初級卵泡的顆粒細(xì)胞為單層;次級卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層;成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓,著色深,細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長突起伸入放射帶的凹陷部。

5.方法簡介:

實驗室分離采用先機械分離后膠原酶 - 聯(lián)合消化法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基    含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性    貼壁

細(xì)胞形態(tài)    上皮細(xì)胞樣

傳代特性    可傳1代

消化液    0.25%

培養(yǎng)條件    氣相:空氣,95%;CO2,5%

體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):二、免疫熒光鑒定:

   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?br/>    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

tPSA總前列腺特異抗原ELISA試劑盒    tPSA ELISA Kit    48T/96T

PCX足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA試劑盒    PCX ELISA Kit    48T/96T

HIS組胺ELISA試劑盒    HIS ELISA Kit     48T/96T

H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B組蛋白H3.3ELISA試劑盒    Histone H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA kit    48T/96T

SETD7組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7ELISA試劑盒    SETD7 ELISA Kit    48T/96T

HDAC組蛋白去乙?;窫LISA試劑盒    HDAC ELISA Kit    48T/96T

HDAC3組蛋白去乙?;?ELISA試劑盒    HDAC3 Elisa kit    48T/96T

HDAC2組蛋白脫乙?;?ELISA試劑盒    HDAC2 ELISA Kit    48T/96T

HAT組蛋白乙?;窫LISA試劑盒    HAT ELISA Kit    48T/96T

CTSC組織蛋白酶CELISA試劑盒    CTSC ELISA Kit    48T/96T

Cath G Ab組織蛋白酶G自身抗體ELISA試劑盒    Cath G Ab ELISA Kit    48T/96T

CTSH組織蛋白酶HELISA試劑盒    CTSH ELISA kit    48T/96T

CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒    Cathepsin L1 ELISA Kit    48T/96T

Cath Ab組織蛋白酶抗體ELISA試劑盒    Cath Ab ELISA Kit    48T/96T

HD組織蛋白去乙?;窫LISA試劑盒    HD ELISA Kit     48T/96T

大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠肺成纖維細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠成骨細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸平滑肌細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸黏膜上皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸巨噬細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

雞卵泡顆粒細(xì)胞大鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞    5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶

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