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魚脾淋巴細胞

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更新時間:2023-04-21 16:53:49瀏覽次數(shù):386

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脾臟
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詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

魚脾淋巴細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

脾臟

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自脾臟組織;脾臟是機體大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結腸脾溝相鄰,地柔軟的網狀內皮細胞器官。淋巴細胞(lymphocyte)白細胞的一種,由淋巴器官產生,機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當器官(有人認為在哺乳動物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞,成熟后將其轉送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

中心體蛋白1+2抗體 6號染色體開放閱讀框58封閉多肽 

磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體 γ 谷氨酰半胱氨連接調節(jié)亞基 

17β羥基類固醇脫氫12/17β-HSD12抗體 連接粘附分子2封閉多肽 

磷化絲裂原活化蛋白激激4抗體 富含亮氨蛋白LRP130封閉多肽 

膜磷脂轉移蛋白1抗體 EML2蛋白封閉多肽 

磷化細胞周期檢測點激2抗體 血管內皮生長因子A封閉多肽 

卷曲螺旋結構域蛋白117抗體 胰腺衍生因子封閉多肽 

英文名稱: PDX1 順氯氨鉑耐藥相關蛋白9封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框74抗體 GADD45G封閉多肽 

磷化粘著斑蛋白抗體 突觸富含脯氨膜蛋白7封閉多肽 

卷曲螺旋結構域蛋白75抗體 微小染色體維持缺陷蛋白結合蛋白封閉多肽 

B淋巴細胞成熟因子(CD269)抗體 微管蛋白α/Tubulin α封閉多肽 

腦蛋白1抗體 SPRED2蛋白封閉多肽 

富含亮氨重復蛋白30抗體 胰島受體相關受體封閉多肽 

NADH復合體5抗體 自噬相關蛋白4B封閉多肽 

核孔蛋白樣蛋白1抗體 異質核核糖核蛋白H2封閉多肽 

彈性蛋白微原纖維界面因子2抗體 Rh血型C抗原封閉多肽 

磷化轉移生長因子β受體2抗體 14號染色體開放閱讀框59封閉多肽 
魚脾淋巴細胞豬成骨細胞培養(yǎng)基100mL豬成骨細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持豬成骨細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含豬成骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬成骨細胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腎臟巨噬細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎臟巨噬細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠腎臟巨噬細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠腎臟巨噬細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎臟巨噬細胞的體外培養(yǎng)。

兔角膜基質細胞培養(yǎng)基100mL兔角膜基質細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持兔角膜基質細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含兔角膜基質細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔角膜基質細胞的體外培養(yǎng)。

小鼠小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL小鼠小腸平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持小鼠小腸平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含小鼠小腸平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠小腸平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

THP-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4THP-1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持THP-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含THP-1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于THP-1細胞的體外培養(yǎng)。

人椎間盤纖維環(huán)細胞培養(yǎng)基100mL人椎間盤纖維環(huán)細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持人椎間盤纖維環(huán)細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含人椎間盤纖維環(huán)細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人椎間盤纖維環(huán)細胞的體外培養(yǎng)。

RPMI-1640無糖(不含酚紅)500mL-


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