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大鼠氣管上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:55:44瀏覽次數(shù):325

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 氣管
大鼠氣管上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔子宮平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔卵巢表面上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔乳腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔乳腺成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔卵巢內(nèi)膜細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠氣管上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

氣管

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開(kāi)狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用鏈霉dan白-中性dan白混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

整合α3重鏈抗體 KIAA1530蛋白封閉多肽 

SUSD5蛋白抗體 磷化帕金蛋白封閉多肽 

脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體 CD8封閉多肽 

MKX蛋白抗體 重組人骨鈣蛋白 

絲裂原活化蛋白激3K9抗體 生長(zhǎng)激封閉多肽 

CREB結(jié)合蛋白抗體 原鈣粘蛋白γ10封閉多肽 

CISD1蛋白抗體 蛋白磷3調(diào)節(jié)亞基R2封閉多肽 

JmjC結(jié)構(gòu)域組蛋白去甲基化H3-K36抗體 MKLN1封閉多肽 

鈣粘蛋白23抗體 肉堿氧位甲基轉(zhuǎn)移封閉多肽 

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員26B抗體 DeltaD封閉多肽 

環(huán)指蛋白94抗體 線粒體核糖體蛋白L49封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD封閉多肽 

腦特異性蛋白BPX抗體 重組人白細(xì)胞抗原B蛋白 

SNAPC3蛋白抗體 Rab4相互作用蛋白封閉多肽 

糖皮質(zhì)激受體(β)抗體 重組白細(xì)胞介1受體相關(guān)蛋白 

F-box蛋白家族FBXO25抗體 ZC3H15蛋白封閉多肽 

載脂蛋白C2抗體 缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白/HIGD1A封閉多肽 

中心體蛋白89抗體 DUS1L蛋白封閉多肽 
大鼠氣管上皮細(xì)胞SK-OV-3/DDP細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SK-OV-3/DDP細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SK-OV-3/DDP細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SK-OV-3/DDP細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SK-OV-3/DDP細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠骨髓造血干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠骨髓造血干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠骨髓造血干細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠骨髓造血干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠骨髓造血干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

人角膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人角膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人角膜基質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人角膜基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人角膜基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人口腔黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人口腔黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人口腔黏膜成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人口腔黏膜成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人口腔黏膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

OV-90細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4OV-90細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持OV-90細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含OV-90細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于OV-90細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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