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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> 植物蛋白提取試劑盒 蛋白相互作用適用(pull-down,CO-IP等)

植物蛋白提取試劑盒 蛋白相互作用適用(pull-down,CO-IP等)
  • 植物蛋白提取試劑盒 蛋白相互作用適用(pull-down,CO-IP等)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 貝博生物
  • 型號(hào)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地
屬性

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更新時(shí)間:2025-03-27 18:31:02瀏覽次數(shù):167評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 植物蛋白提取試劑盒提供全套試劑,適用于從各種植物細(xì)胞、組織樣本中提取總蛋白。提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便。 本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份,包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。 本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。 本試劑盒中不含有EDTA,與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完!
有效期
一年
檢測(cè)方法
Pull-down、co-IP等
適用樣本
植物
產(chǎn)品特點(diǎn)
1.使用方便,從細(xì)胞,組織中提取蛋白不需經(jīng)過(guò)研磨、反復(fù)凍融、超聲破碎等前處理。
2.提取過(guò)程簡(jiǎn)單方便,將蛋白提取的時(shí)間縮短至1小時(shí)。
3.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
4.紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
5.總蛋白提取液含多種有效成分,可以充分釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白,又可結(jié)合釋出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64,每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產(chǎn)品應(yīng)用
Pull-down、co-IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項(xiàng)
使用注意事項(xiàng):
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
? 下游實(shí)驗(yàn)如果是進(jìn)行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性檢測(cè),提取液可以不加蛋白酶抑制劑或磷酸酶抑制劑,注意提取過(guò)程保持低溫操作,縮短離心時(shí)間。
使用方法
1. 提取液準(zhǔn)備:
每500 μl冷的提取液A中加入4 μl蛋白穩(wěn)定劑和2 μl蛋白酶抑制劑,混勻后置冰上備用。
2. 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的100-200 mg鮮嫩植物組織樣本用刀盡可能剪碎,加入500 μl提取液A后用勻漿機(jī)/勻漿器充分勻漿。
3. 將勻漿液吸入一個(gè)預(yù)冷的干凈離心管中在4℃振蕩30分鐘-1小時(shí)。
4. 在4℃,12000×g條件下離心10-15分鐘。
5. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到植物總蛋白。
6. 上述蛋白提取物請(qǐng)分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

常見問(wèn)題分析
1.蛋白濃度低?
處理部分組織樣本時(shí)可能沒(méi)有裂解,導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長(zhǎng)試劑A的處理時(shí)間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理,沒(méi)有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。

2.用什么方法定量蛋白?
建議用BCA法。不適合用Bradford法,因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份,導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過(guò)透析處理或者用脫鹽柱改換過(guò)緩沖體系,則可以用Bradford法定量。

3.提取時(shí)出現(xiàn)膠狀沉淀?
蛋白提取液處理產(chǎn)物中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)少量透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的特定蛋白的情況下,可以直接離心取上清進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)即可;如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的核蛋白,則可以通過(guò)超聲處理,300w/10秒間隔10秒,超聲3分鐘,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

4.提取的蛋白具有活性嗎?
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份,不破壞蛋白的結(jié)構(gòu),沒(méi)有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞,蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。

參考文獻(xiàn)
1.Na Zhao, et al.
MutS HOMOLOG1 silencing mediates ORF220 substoichiometric shifting and causes male sterility in Brassica juncea
Journal of Experimental Botany 2016 (IF=5.677)

2.Juxin Yin, et al.
Authentication of Panax ginseng from different regions
RSC Advances 2017 (IF=3.049)

3.XiaokangLi, et al.
Effects of the size and oxidation of graphene oxide on crop quality and specific molecular pathways
Carbon 2018 (IF=7.082)

4.MinZheng, et al.
Arabidopsis GSM1 is involved in ABI4-regulated ABA signaling under high-glucose condition in early seedling growth
Plant Science 2019 (IF=3.785)

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