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時間分辨熒光免疫層析原理

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時間分辨熒光免疫層析原理

當(dāng)將含有待測抗原(抗體)的樣品滴在加樣區(qū),待測樣品中的抗原(抗體)與結(jié)合墊中的熒光納米微球標(biāo)記的抗體(抗原)結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測區(qū)后,與檢測線上固定的抗體(抗原)結(jié)合,形成微粒-抗體-抗原-抗體夾心復(fù)合物并被固定在檢測線上,而多余的熒光微球標(biāo)記物繼續(xù)向前層析,與固定在質(zhì)控線二抗結(jié)合。反應(yīng)結(jié)束后,用紫外光源(340nm)對檢測區(qū)掃描檢測,檢測線和質(zhì)控線上熒光納米微球發(fā)出高強度的熒光(615nm),且衰變時間也較長。利用延緩測量時間,待樣品基質(zhì)中自然發(fā)生的短壽命熒光(1-10ns)全部衰變后,再測量稀土元素的特異性熒光,這樣就可以*排除特異本底熒光的干擾。通過檢測線和質(zhì)控線熒光強度的強弱及其比值,即可分析出樣品中待測物的濃度。

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