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在單克隆抗體的制備過程中，及時凍存原始孔的雜交瘤細胞以及克隆化得到的亞克隆細胞是十分重要的。因為在沒有建立一個穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候，細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能發(fā)生細胞的污染、細胞突變、分泌抗體能力的喪失等等。如果沒有原始細胞的凍存，則可能因上述意外而前功盡棄。 因此，雜交瘤細胞的凍存在單克隆抗體制備過程中起著關(guān)鍵性作用。
目前，雜交瘤細胞的凍存方法同其他細胞系的凍存方法是一樣的。
傳統(tǒng)雜交瘤細胞的凍存：
傳統(tǒng)細胞凍存液的組分：培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，或90%的血清+10% DMSO
傳統(tǒng)雜交瘤細胞凍存方法：
1. 初篩、復(fù)篩驗證陽性的每個單克隆細胞轉(zhuǎn)種3個48孔板的培養(yǎng)孔，培養(yǎng)至匯合度達90%；
2. 吸去培養(yǎng)基，加入傳統(tǒng)細胞凍存液（需現(xiàn)用現(xiàn)配）重懸細胞，調(diào)整濃度至1x106/ml，然后將這3個48孔板的培養(yǎng)孔細胞凍存懸液合并至一支細胞凍存管中；
3. 程序降溫方法凍存，先將凍存管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），后才移至液氮罐中進行長期的儲存。
（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡。）
傳統(tǒng)雜交瘤細胞凍存面臨的困難：
1. 需現(xiàn)配凍存液，步驟繁瑣；
2. 因不能孔板原位凍存，且不能微量凍存，所以需將3孔細胞合并一管凍存管凍存，步驟繁瑣；
3. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣；
4. 含血清，細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高；
5. 血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異；
6. 只能液氮凍存，不能-80℃冰箱凍存。
Cellregen無血清細胞凍存液，是一款可用于雜交瘤細胞凍存的凍存液，成分明確，含DMSO、糖類、氨基酸等成分，不含血清和動物源成分的通用型凍存液。
可取4mL無血清細胞凍存液試用裝
申領(lǐng)活動日期：2019.11.18-2019.12.31
Cellregen無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的方法：
1. 驗證陽性克隆的細胞培養(yǎng)孔，將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈；
2. 加入適量Cellregen無血清細胞凍存液，充分浸潤細胞（無需消化細胞）；
3. 蓋上蓋板，直接放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。
可見，Cellregen無血清細胞凍存液凍存雜交瘤細胞的優(yōu)勢：簡單、方便、快捷
1. 即用型，無需現(xiàn)配，可直接使用
2. 可孔板原位凍存，可微量凍存，無需使用凍存管
3. 無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單
4. 不含血清，大大減少細胞污染
5. 因不含血清，批次間差異小
6. 無需液氮，-80℃冰箱長期凍存
