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技術(shù)文章

探針法PCR試劑盒步驟構(gòu)成特點(diǎn)

閱讀:1459          發(fā)布時(shí)間:2021-3-18

探針法PCR試劑盒步驟構(gòu)成:

1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。

2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合。

3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在72℃、DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

探針法PCR試劑盒特點(diǎn):

1. 即開即用,用戶只需要提供樣品rna模板。

2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。

3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特---高,引物是根據(jù)傘枝梨頭霉高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他---的rna發(fā)生交叉反應(yīng)。

5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μl 體系的探針法熒光定量 rt-pcr 反應(yīng)。

6. 本產(chǎn)品只能用于科研。

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