會(huì)員.png)
8
當(dāng)前位置：蘇州飛時(shí)曼精密儀器有限公司>>技術(shù)文章>>分析熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求
分析熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求
熒光顯微鏡(Fluorescencemicroscope)：熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
一般情況下，單獨(dú)使用熒光顯微鏡即可以達(dá)到我們想要的成像效果，但在某些情況下，比如說(shuō)當(dāng)熒光比較微弱的情況下，僅僅通過(guò)熒光顯微鏡并不能達(dá)到理想的拍攝效果，或者我們希望可以將拍攝的熒光圖片上傳的電腦生面預(yù)覽，修改甚至發(fā)表學(xué)術(shù)論文，這時(shí)候沒(méi)有熒光顯微鏡CCD是不能達(dá)到要求的。
熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求：
1、載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
2、蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用于涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起到不同干涉作用的物質(zhì)（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利通過(guò)，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標(biāo)本。
3、標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，若太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。
4、封裱劑
封裱劑常用甘油，必須無(wú)自發(fā)熒光，無(wú)色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時(shí)較亮，不易很快褪去。
5、鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須使用鏡油，使用特制的無(wú)熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。