LC-MS(液相色譜-質譜聯(lián)用技術)是一種結合了液相色譜(LC)和質譜(MS)的分析技術,廣泛應用于復雜樣品的分離和鑒定。以下是工作原理:
液相色譜用于分離樣品中的各組分,基本原理是利用不同組分在流動相和固定相之間的分配差異實現(xiàn)分離。
樣品注入:樣品溶液通過進樣器注入色譜系統(tǒng)。
流動相輸送:高壓泵將流動相(液體溶劑)輸送至色譜柱。
分離過程:樣品中各組分在色譜柱中與固定相(填充材料)發(fā)生相互作用,因分配系數(shù)不同而以不同速度通過色譜柱,實現(xiàn)分離。
檢測器:分離后的組分依次流出色譜柱,進入檢測器(在LC-MS中,檢測器為質譜儀)。
質譜用于對分離后的組分進行鑒定和定量分析,基本原理是將分子離子化后,根據(jù)質荷比(m/z)進行分離和檢測。
離子化:從LC流出的組分進入質譜儀的離子源,被離子化。常見的離子化方式有:
電噴霧離子化(ESI):適用于極性化合物。
大氣壓化學離子化(APCI):適用于非極性或弱極性化合物。
其他離子化方式:如MALDI、APPI等。
質量分析:離子化后的分子進入質量分析器,根據(jù)質荷比(m/z)進行分離。常見的質量分析器有:
四極桿(Quadrupole):通過電場篩選特定m/z的離子。
飛行時間(TOF):根據(jù)離子飛行時間分離。
離子阱(Ion Trap):捕獲并分離離子。
軌道阱(Orbitrap):利用靜電場分離離子,具有高分辨率。
檢測器:分離后的離子到達檢測器,產生信號,信號強度與離子數(shù)量成正比。
LC-MS將液相色譜的分離能力與質譜的高靈敏度和特異性結合,適用于復雜樣品的分析。
樣品分離:樣品通過液相色譜分離成單一組分。
組分轉移:分離后的組分依次進入質譜儀。
離子化與分析:組分在質譜儀中被離子化并分析。
數(shù)據(jù)采集:質譜儀生成質譜圖,顯示各組分的信息(如分子量、碎片離子等)。
數(shù)據(jù)處理:通過軟件分析質譜數(shù)據(jù),鑒定化合物并定量。
高靈敏度:可檢測極低濃度的化合物。
高選擇性:通過質譜的精確質量測定,區(qū)分結構相似的化合物。
廣泛應用:適用于藥物分析、環(huán)境檢測、食品安全、代謝組學等領域。
復雜樣品分析:可同時分離和鑒定復雜混合物中的多種組分。
藥物分析:藥物代謝物鑒定、藥代動力學研究。
環(huán)境檢測:水中污染物、農藥殘留分析。
食品安全:食品添加劑、毒素檢測。
生命科學:蛋白質組學、代謝組學研究。
臨床診斷:生物標志物檢測、疾病診斷。
高靈敏度和特異性。
可同時進行定性和定量分析。
適用于復雜樣品的分析。
儀器成本高,維護復雜。
樣品前處理要求較高。
對操作人員的技術要求較高。