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淺談LC-MS工作原理

閱讀:71      發(fā)布時間:2025-3-8
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LC-MS(液相色譜-質譜聯(lián)用技術)是一種結合了液相色譜(LC)和質譜(MS)的分析技術,廣泛應用于復雜樣品的分離和鑒定。以下是工作原理:

1. 液相色譜(LC)部分

液相色譜用于分離樣品中的各組分,基本原理是利用不同組分在流動相和固定相之間的分配差異實現(xiàn)分離。

工作流程:

  • 樣品注入:樣品溶液通過進樣器注入色譜系統(tǒng)。

  • 流動相輸送:高壓泵將流動相(液體溶劑)輸送至色譜柱。

  • 分離過程:樣品中各組分在色譜柱中與固定相(填充材料)發(fā)生相互作用,因分配系數(shù)不同而以不同速度通過色譜柱,實現(xiàn)分離。

  • 檢測器:分離后的組分依次流出色譜柱,進入檢測器(在LC-MS中,檢測器為質譜儀)。


2. 質譜(MS)部分

質譜用于對分離后的組分進行鑒定和定量分析,基本原理是將分子離子化后,根據(jù)質荷比(m/z)進行分離和檢測。

工作流程:

  • 離子化:從LC流出的組分進入質譜儀的離子源,被離子化。常見的離子化方式有:

    • 電噴霧離子化(ESI):適用于極性化合物。

    • 大氣壓化學離子化(APCI):適用于非極性或弱極性化合物。

    • 其他離子化方式:如MALDI、APPI等。

  • 質量分析:離子化后的分子進入質量分析器,根據(jù)質荷比(m/z)進行分離。常見的質量分析器有:

    • 四極桿(Quadrupole):通過電場篩選特定m/z的離子。

    • 飛行時間(TOF):根據(jù)離子飛行時間分離。

    • 離子阱(Ion Trap):捕獲并分離離子。

    • 軌道阱(Orbitrap):利用靜電場分離離子,具有高分辨率。

  • 檢測器:分離后的離子到達檢測器,產生信號,信號強度與離子數(shù)量成正比。


3. LC-MS聯(lián)用技術

LC-MS將液相色譜的分離能力與質譜的高靈敏度和特異性結合,適用于復雜樣品的分析。

工作流程:

  1. 樣品分離:樣品通過液相色譜分離成單一組分。

  2. 組分轉移:分離后的組分依次進入質譜儀。

  3. 離子化與分析:組分在質譜儀中被離子化并分析。

  4. 數(shù)據(jù)采集:質譜儀生成質譜圖,顯示各組分的信息(如分子量、碎片離子等)。

  5. 數(shù)據(jù)處理:通過軟件分析質譜數(shù)據(jù),鑒定化合物并定量。


4. LC-MS的主要特點

  • 高靈敏度:可檢測極低濃度的化合物。

  • 高選擇性:通過質譜的精確質量測定,區(qū)分結構相似的化合物。

  • 廣泛應用:適用于藥物分析、環(huán)境檢測、食品安全、代謝組學等領域。

  • 復雜樣品分析:可同時分離和鑒定復雜混合物中的多種組分。


5. LC-MS的應用

  • 藥物分析:藥物代謝物鑒定、藥代動力學研究。

  • 環(huán)境檢測:水中污染物、農藥殘留分析。

  • 食品安全:食品添加劑、毒素檢測。

  • 生命科學:蛋白質組學、代謝組學研究。

  • 臨床診斷:生物標志物檢測、疾病診斷。


6. LC-MS的優(yōu)缺點

優(yōu)點:

  • 高靈敏度和特異性。

  • 可同時進行定性和定量分析。

  • 適用于復雜樣品的分析。

缺點:

  • 儀器成本高,維護復雜。

  • 樣品前處理要求較高。

  • 對操作人員的技術要求較高。



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