Mach1-T1 Chemically Competent Cell

產品規(guī)格:  100μl×20

Mach1-T1感受態(tài)細胞基因型:

F^- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(r_K^- m_K⁺) ΔrecA1398 endA1 tonA
Mach1-T1感受態(tài)細胞簡要說明：
   Mach1-T1 菌株由野生型 non-K-12 E. Coli W 菌株改造而來，是目前生長速度較快的感受態(tài)細胞之一，在 平板上 9 h 可見克隆，缺失核酸內切酶 (endA)，提高了質粒 DNA 的產量和質量；重組酶缺陷型 (recA1398)減少插入片段的同源重組概率，保證了插入 DNA 的穩(wěn)定性；lacZ M15 的存在使 Mach1-T1 可用于藍、白斑篩選；tonA 突變賦予 Mach1-T1 菌株對噬菌體 T1 和 T5 的抗性。Mach1-T1 感受態(tài)細胞 經特殊工藝制作，pUC19 質粒檢測轉化效率>10⁹ cfu/μg DNA。
Mach1-T1感受態(tài)細胞操作說明：

1. 1. 1. Mach1-T1 感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分鐘后待菌塊融化，加入目的 DNA（質?；蜻B接 產物）并用手 EP 管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置 25 分鐘。
      2. 42℃水浴熱激 45 秒，迅速放回冰上并靜置 2 分鐘，晃動會降低轉化效率。
2. 1. 1. 向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT 或 LB)，混勻后 37℃，200 rpm 復蘇 60 分鐘。
3. 1. 1. 5000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的 2YT 或 LB 培養(yǎng)基上。
      2. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放 37℃培養(yǎng)至少 13 h。

Mach1-T1感受態(tài)細胞注意事項：
1、感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內加入目標 DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間 存放會降低轉化效率。
2、混入目的 DNA 時應輕柔操作。
3、轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少終用于涂板的菌量。
Mach1-T1感受態(tài)細胞其他推薦：