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Bel-7405人肝癌細(xì)胞上海淳麥生物科技有限公司是一家專(zhuān)注于研發(fā)和生產(chǎn)免疫細(xì)胞及干細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品的生物高科技企業(yè)，致力于打造國(guó)內(nèi)原代細(xì)胞研發(fā)和服務(wù)平臺(tái)，做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家“。產(chǎn)品涵蓋免疫細(xì)胞及干細(xì) 胞、細(xì)胞系、*培養(yǎng)基、無(wú)血清培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、轉(zhuǎn)染試劑、胰酶等細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品。

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng)	Bel-7405人肝癌細(xì)胞（STR鑒定正確）
細(xì)胞別稱(chēng)	BEL7405；人肝癌細(xì)胞；Bel-7405; BEL 7405; Bel 7405
種屬來(lái)源	人
年齡性別	女
組織來(lái)源	肝臟
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)	10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格	1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)	無(wú)
保藏機(jī)構(gòu)	上海中科院
培養(yǎng)基	90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞貨期	現(xiàn)貨，1周左右
運(yùn)輸方式	復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用）順豐快遞
供應(yīng)限制	僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用
特別說(shuō)明	以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨方式		T25瓶	凍存管
收貨處理		觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)	收到細(xì)胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇
傳代密度		細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)	第二天換液并檢查細(xì)胞密度
傳代比例		傳代建議1：2傳代 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿	一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
傳代方法		a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，棄去消化液，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。 c、按6-8 mL/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心4 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 d、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。	將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
注意事項(xiàng)		1.運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。	1.收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存； 2.為保證細(xì)胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請(qǐng)立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。
到貨須知	1.收到細(xì)胞后，首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照（當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照），記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。 3.由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞

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