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流動(dòng)相為什么要過(guò)濾？
*，色譜系統(tǒng)是一種精密的設(shè)備，對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性要求也很高，因此，由于色譜系統(tǒng)的精密性和對(duì)結(jié)果分析的準(zhǔn)確性要求，對(duì)樣品的過(guò)濾顯得尤為重要。我們?cè)跇悠分苽涞?/span>每步不可掉以輕心。正如液相色譜系統(tǒng)的說(shuō)明書中所要求的，流動(dòng)相得須使用HPLC的試劑，且使用前須過(guò)濾。
為什么要減壓過(guò)濾？
過(guò)濾可以保護(hù)色譜系統(tǒng)和色譜柱，長(zhǎng)柱子的使用壽命，改善數(shù)據(jù)的精度。過(guò)濾可以消由于摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動(dòng)和無(wú)規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動(dòng)。同時(shí)，過(guò)濾也能夠去流動(dòng)相中的顆粒雜質(zhì)，免它們對(duì)內(nèi)密封圈造成損害，或堵塞小孔管道、層析柱、線內(nèi)過(guò)濾器及保護(hù)柱。
一般流動(dòng)相在上儀器前須經(jīng)過(guò)兩個(gè)步驟：減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個(gè)目的，
一個(gè)是過(guò)濾掉氣體，尤是有機(jī)相和水相混合的時(shí)候，會(huì)產(chǎn)生大量的氣泡。這些氣泡進(jìn)入儀器就會(huì)堵住儀器和色譜柱，所以要除掉。
一個(gè)是過(guò)濾掉不溶性微粒。你看一般的過(guò)濾膜是4.5um孔徑的，這個(gè)是針對(duì)你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑，過(guò)濾的流動(dòng)相里面小的毛絮啊，顆粒啊不會(huì)進(jìn)入色譜柱。
超聲的主要目的也是為了脫氣，另外還助令溶液混合均勻等作用。不過(guò)超聲主要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡，所以沒(méi)要超聲太久的時(shí)間，3-5min夠了。
總而言之，都是為了保護(hù)儀器和色譜柱，防氣泡和雜質(zhì)進(jìn)入。
過(guò)濾用什么？
一般建議使用的過(guò)濾器。也許有人認(rèn)為，過(guò)濾裝置貌似挺貴，算了，買個(gè)砂芯漏斗得了。哎，同學(xué)，這么貴的房子都買了，還在乎一把鎖？
使用的流動(dòng)相過(guò)濾器，簡(jiǎn)單，而且全。
如何過(guò)濾？
只要按照下圖的說(shuō)明，依次放置好濾器和管線，再啟動(dòng)真空泵可開始過(guò)濾。
在操作過(guò)程中，有一點(diǎn)需要注意，須用干燥的過(guò)濾膜和干燥的支撐底座進(jìn)行過(guò)濾，以防空氣在膜上形成氣阻，這個(gè)阻力可使液體流速下降或阻止液體流出。在將過(guò)濾膜放在濾器上之前，須保濾器是清潔、干燥的。