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大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

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  大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書

  BS-3658   天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒

  大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說明書主要包括以下內(nèi)容:

  1. ?實(shí)驗(yàn)原理?

  該試劑盒采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通過純化的大鼠Klotho蛋白抗體包被微孔板,形成固相抗體,依次加入Klotho蛋白和HRP標(biāo)記的Klotho蛋白抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后,加入底物TMB顯色,顏色深淺與樣品中Klotho蛋白含量呈正相關(guān)。最后用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?。

  2. ?試劑盒組成?

  30倍濃縮洗滌液:20ml×1瓶

  酶標(biāo)試劑:6ml×1瓶

  標(biāo)準(zhǔn)品:2瓶

  稀釋液:1×45mL

  檢測溶液A:1×120μL

  檢測溶液B:1×120μL

  TMB底物:1×9mL

  終止液:1×6mL

  96孔板(預(yù)包被):1塊

  96孔板覆膜:2張

  使用說明書:1份?。

  3. ?樣本處理及要求?

  血清?:全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,1000×g離心20分鐘,取上清,避免反復(fù)凍融?。

  血漿?:使用EDTA或肝素抗凝,采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃離心,取上清?。

  細(xì)胞上清液?:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒?。

  組織勻漿?:將組織加入適量生理鹽水搗碎,離心后取上清?。

  4. ?實(shí)驗(yàn)步驟?

  加樣:標(biāo)準(zhǔn)品及樣本各50μL,37℃孵育30分鐘?。

  洗滌:洗板5次,加入酶標(biāo)試劑50μL,37℃孵育30分鐘?。

  顯色:加入顯色液A、B各50μL,37℃孵育15分鐘?。

  終止:加入終止液50μL,立即用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度?。

  5. ?注意事項(xiàng)?

  試劑盒需在2-8℃保存,開封后酶標(biāo)板需密封保存于-20℃?。

  實(shí)驗(yàn)過程中需避免樣本反復(fù)凍融,確保操作環(huán)境溫度、濕度一致?。

  試劑盒有效期一般為6個月至12個月,具體以標(biāo)簽為準(zhǔn)?。

  6. ?適用范圍?

  該試劑盒適用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中Klotho蛋白的含量?。

  以上內(nèi)容綜合了多個來源的實(shí)驗(yàn)使用說明書,確保實(shí)驗(yàn)操作的準(zhǔn)確性和可靠性?。

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